真菌的培养

第三节　真菌的培养

一、培养条件

真菌对外界环境适应力强，对营养要求不高，在一般培养基上均能生长，常用弱酸性的沙堡弱培养基或马铃薯琼脂培养基，最适培养温度为22℃～28℃，深部感染的真菌，如寄生于动物内脏的病原性真菌则在37℃时生长最好。pH在3～6均可生长，体外培养的最适pH为5.5～6.0；适宜生长在潮湿的环境中，需氧条件下生长良好（酵母菌必须在厌氧条件下才能发酵产生酒精）；少数是严格厌氧菌，如反刍动物瘤胃中的真菌。

二、培养方法

真菌的酵母细胞、小段断裂的菌丝和孢子（无性或有性孢子），都可以生长发育成新的个体。酵母菌的分离方法同细菌，可在固体平板上进行划线分离或稀释法得到其纯培养。菌丝片段、孢子均可通过划线法和稀释法得到纯菌种。产生子实体的真菌还可以通过无菌操作取出子实体内部的一小块组织，直接放在适宜的培养基上培养，可获得纯菌种。实验室中进行菌种分离、菌种培养和研究时常使用琼脂斜面和琼脂平板，真菌在其上呈现菌落或菌苔生长，便于观察和分离；还可以采用载片湿室培养法培养真菌（图4-8），培养后可直接在显微镜下观察载片上真菌的菌丝及孢子形态，以鉴定真菌。真菌制曲及生产发酵饲料时所用的发酵培养基以谷糠、麸皮等农副产品为原料，按真菌营养要求合理搭配，加适量的水拌匀，经过蒸煮灭菌后，接入菌种进行培养。生产单细胞蛋白饲料常采用液体培养方法。

图4-8　真菌的载片湿室培养

三、培养特征

酵母菌细胞在固体培养基上形成的菌落多数为乳白色，少数是黄色或红色。菌落表面光滑、湿润和黏稠，与某些细菌的菌落相似，但一般比细菌的菌落大而厚。酵母菌细胞生长在培养基的表面，菌体容易挑起。有些酵母菌表面是干燥粉状的，有些种培养时间长了，菌落呈皱缩状，还有些种可以形成同心环状等。

霉菌的菌落比细菌、酵母菌的都要大，主要有绒毛状、絮状和蜘蛛网状等形状，为丝状菌落。菌落最初呈浅色或白色，当孢子逐渐成熟，菌落相应地呈黄、绿、青、黑、橙等颜色，有的产生色素，使菌落背面也带有颜色或使培养基变色。