一、目的要求
了解植物病原真菌菌丝体及其变态和菌组织体、无性繁殖体和有性生殖体的形态结构特征和类型，熟练掌握植物病原真菌的制片方法，初步掌握绘制植物病原真菌草图的技术。
二、材料和用具
（一）实验材料
1.冬瓜绵腐病菌（Pythium a phanidermatum）纯培养（菌丝、卵孢子）
2.立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）纯培养（菌丝）
3.十字花科蔬菜霜霉病（Peronospora parasitica）新鲜标本（具霜状霉层）、吸器和卵孢子玻片
4.匍枝根霉（Rhizopus stolonifer）纯培养（假根、孢子囊）、接合孢子玻片
5.柑橘炭疽病（Colletotrichum gloeosporioides）新鲜标本（具黑点）、分生孢子盘和附着胞玻片
6.柑橘烟煤病（Meliola butleri）附着枝玻片
7.十字花科蔬菜菌核软腐病（Sclerotinia sclerotiorum）菌核、菌核萌发，菌核剖面和子囊盘切片玻片
8.苹果紫纹羽病（Helicobasidium purpureum）根状菌索
9.麦角病（Claviceps purpurea）麦角萌发、子座横切玻片
10.番茄晚疫病（Phytophthora infestans）新鲜标本（具霉层）
11.蕹菜白锈病（Albugo ipomoeae-aquaticae）新鲜标本（具霉层）
12.南瓜白粉病（Sphaerotheca Macularis）新鲜标本（具白粉）
13.番茄早疫病菌（Alternaria solani）纯培养（已产分生孢子）
14.茄褐纹病（Phomopsis vexans）分生孢子器切片玻片
15.茄枯萎病菌（Fusarium oxysporum）纯培养（菌丝）、分生孢子座玻片
16.十字花科蔬菜根肿病（Plasmodiophora brassicae）休眠孢子切片玻片
17.马铃薯粉痂病（Spongospora subterranean）休眠孢子堆切片玻片
18.苹果树腐烂病（Valsa mali）子囊壳剖面玻片
19.柑橘疮痂病（Elsinoe fawcetti）子囊腔剖面玻片
20.梨锈病（Gymnos porangium haradanum）冬孢子萌发玻片
21.小麦白粉病（Blumeria graminis）新鲜标本（具白粉）、闭囊壳切片玻片
（二）实验用具
显微镜、载玻片、盖玻片、浮载剂（蒸馏水和乳酚油）、挑针、镊子、刀片、通草、擦镜纸、无菌水等。
三、内容和方法
（一）真菌的营养体观察
1.菌丝体
（1）无隔菌丝
挑取培养皿中的冬瓜绵腐病菌或匍枝根霉菌丝体少许，用蒸馏水或乳酚油作浮载剂，制作临时玻片镜检，观察菌丝形态特点。
（2）有隔菌丝
挑取培养皿中的立枯丝核菌、茄枯萎病菌菌丝体少许，用蒸馏水或乳酚油作浮载剂，制作临时玻片镜检，观察菌丝形态特点。
2.菌丝变态
（1）吸器
观察十字花科蔬菜霜霉病菌（玻片）、小麦白粉病菌（撕片）的吸器形态。
（2）假根
挑取培养皿中的匍枝根霉制片，观察孢囊梗基部的假根。
（3）附着胞
观察柑橘炭疽病菌分生孢子萌发产生的附着胞形态。
（4）附着枝
观察柑橘烟煤病菌附着枝形态。
3.菌组织体
（1）菌核
观察十字花科蔬菜菌核软腐病菌菌核的形态、大小、颜色等，并镜检菌核剖面，比较菌核内、外部组织细胞形态、颜色及排列情况。
（2）菌索
观察苹果紫纹羽病菌的根状菌索。
（3）子座
观察麦角病菌的头状子座及子座横切玻片，注意子座内子囊壳的排列状。
（二）真菌的繁殖体观察
1.无性繁殖体
（1）游动孢子囊及游动孢子
挑取冬瓜绵腐病菌、番茄晚疫病菌、十字花科蔬菜霜霉病菌，制作临时玻片，徒手切蕹菜白锈病病斑，制作临时玻片，观察其孢囊梗、游动孢子囊的形态。 挑取番茄晚疫病菌或蕹菜白锈病菌孢子囊少许于载玻片上的无菌水中，室温放置20min左右，观察游动孢子的形成、释放、游动、休止及休止孢的萌发。
（2）孢子囊及孢囊孢子
挑取匍枝根霉制作临时玻片，镜检孢子囊和孢囊孢子。 注意观察孢子囊的结构、囊轴、囊托、孢囊梗与假根的位置。
（3）分生孢子
挑取番茄早疫病菌、茄枯萎病菌，撕取南瓜白粉病菌，制作临时玻片，镜检观察。 镜检茄褐纹病、茄枯萎病、柑橘炭疽病病原玻片。 注意比较这几种病原菌分生孢子的形态、颜色、分隔以及载孢体（分生孢子梗、分生孢子盘、分生孢子器、分生孢子座）形态。
（4）厚垣孢子
挑取茄枯萎病菌制片，镜检。 注意观察菌丝中或分生孢子中个别细胞膨大、细胞壁加厚的厚垣孢子，观察其形态、着生位置及着生方式。
2.有性生殖体
（1）休眠孢子
镜检十字花科蔬菜根肿病菌、马铃薯粉痂病菌，观察其休眠孢子的形态及排列方式。
（2）卵孢子
挑取冬瓜绵腐病菌，制片观察。 镜检十字花科蔬菜霜霉病菌玻片，观察其卵孢子形态。
（3）接合孢子
镜检匍枝根霉玻片，观察接合孢子以及接合柄的形态。
（4）子囊果、子囊及子囊孢子
观察十字花科蔬菜菌核软腐病菌菌核萌发产生的子囊盘形态，镜检其子囊盘切片；镜检小麦白粉病菌闭囊壳切片、麦角病菌子座切片、苹果树腐烂病菌子囊壳切片、柑橘疮痂病菌子囊腔切片。 观察各种子囊果、子囊及子囊子孢子的形态、结构。
（5）担子孢子
观察梨锈病菌冬孢子萌发形成的有隔担子及担子孢子的形态。
四、实验学时
3~6学时。
五、作业与思考题
1.试着对不同病征采用不同制片方法制作病原菌临时玻片，并镜检。
2.绘制无隔菌丝、有隔菌丝、各类菌丝变态、无性繁殖体和有性生殖体的形态图。
3.菌丝有无隔膜是否能够反映出一定的进化关系？
4.菌核和子座在形态和功能上有何不同？
5.真菌吸器的有无与寄生性的强弱是否有一定关系？
6.分生孢子和孢囊孢子在生成过程、形成数量（与产孢细胞比较）及着生部位等方面有何不同？
7.如何区分分生孢子器和子囊壳？
8.卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担子孢子在有性生殖过程中形成的时期有何不同？
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