杂草的检疫检验方法

第六节　杂草的检疫检验方法

杂草可以通过人为途径传到新区，在适宜的条件下快速繁殖而形成新的入侵生物。杂草的远距离传播方式主要是其种子混杂在调运的植物种子、粮食中，或附着在运输工具、包装材料或其他装载工具上，随着这些物品的调运传到新区。随着我国与世界各国交往愈来愈频繁，进出口的货物种类及数量日益增多，我国各口岸检验检疫局近年来截获的杂草种子频率也越来越高，其中有的是国内没有或仅局部地区发生的危险性杂草。因此加强检疫以有效阻止这些杂草的人为传播是很有必要的。

1.杂草检疫检验的形态基础

针对杂草的检疫主要包括调运检疫和产地检疫两个重要环节，调运检疫检验的重点是杂草种子，产地检疫主要是直接检查生长的杂草植株。因此，杂草的种子和整个生长发育阶段的形态特征是杂草检疫检验的重要依据，其中主要包括以下几个方面：

（1）分类地位同其他植物一样，杂草的分类方式有多种，如根据形态特征可分为禾草类、莎草类和阔叶类；根据其生活史可分为一年生和多年生杂草；根据其茎干木质程度又可分为草本和木本杂草类。这些分类均能反映杂草的一些基本特征或特性。

（2）营养阶段的形态特征主要包括叶片和茎秆形态、颜色、着生方式和分枝特点等。

（3）生殖阶段的花和花序特征包括花的构造、花序种类等。

（4）子实特征是指杂草的果实有多种类型，如荚果、角果、颖果、瘦果等。子实种类与其分类地位密切相关，例如豆科果实为荚果，十字花科的果实为角果，禾本科的果实为颖果，菊科的果实主要是瘦果。种子的区分主要是依据其大小、形态、胚的特征、胚乳的有无、种脐形状等特征。

2.杂草的检验方法

在产地检疫时一般依据上述形态特征可以得出准确的检验结果。在调运检疫时常采用的检验方法有如下几种。

（1）过筛检验在对进出境的植物种子或粮食实施现场检疫时，选取合适孔径的套筛。一般针对不同的植物种子或粮食采取不同规格的筛子。如采用套筛时单柱类的菟丝子集中在孔径2.0～3.5mm的筛子中；其他的菟丝子集中在孔径小于1.8mm的筛子中。过筛后将筛上物和筛下物分别倒入白瓷盘或培养皿中，挑选杂草种子，借助于扩大镜或双目解剖镜观察，根据形态作初步鉴定。必要时送实验室作进一步鉴定。

（2）解剖法是杂草检疫检验的常用方法之一，适用于在外观上难于确定的种子或果实。其方法是：先将种子浸泡在温水中，待其吸水充分膨胀变软后，用解剖刀或刀片将种子纵向或横向剖开，置于双目解剖镜下或用扩大镜观察其内部形态、结构、颜色、胚乳的有无、质地、胚的形状、大小、位置和子叶的数目等进行比较鉴别。

因杂草种子的种类不同，各种杂草种子的浸泡时间是不一致的。一般而言，凡是种皮或果实的果皮质地软、吸水性快、薄的种子则浸泡时间相对较短，例如十字花科植物的种子一般浸泡2～3h即可。而种皮较厚、质地坚硬、吸水性慢的种子则浸泡时间必须延长，一般不应少于一昼夜。

（3）显微切片法适用于通过外部形态和一般解剖法不能鉴定的某些杂草种子或果实的鉴定。这种方法比较复杂而费时。在进行显微观察之前，首先将一粒种子全部或部分的组织制成能供显微镜检视用的切片，再在显微镜下进行观察鉴定。例如豆科植物的种子可根据其种皮结构的不同（即构成种皮的栅状组织的细胞大小、形状以及在栅状组织下的细胞形态等）来区分不同的种。十字花科植物的种子制成切片后，在显微镜下可以从表皮厚壁组织的细胞结构和其他各层细胞的形状特征来鉴别不同的种。如：白芥的厚壁组织细胞的尖端是呈矛状，而结球甘蓝则呈圆形。

十字花科植物的种子表皮显微鉴定方法有两种，一种是将种子首先浸入温水中30min回软后取出，小心地将全部或部分种皮取下，放入10％的硝酸溶液中浸泡1h，使其褪色，而后将已褪色的种皮移置于载玻片上，在种皮上滴一滴甘油，慢慢盖上盖玻片，小心不要有气泡，将载玻片置于显微镜下观察表皮细胞的形状、大小等进行鉴定。另一种方法是将种皮采用石蜡切片法进行切片，然后置于显微镜下进行观察鉴定。

（4）生长检验对于有些通过种子形态不易鉴别的，可以采用种子萌芽生长检验法。可采用纸床、砂床、土壤等进行发芽试验。由于幼苗的形态具有相对稳定的属或种的特征，可为鉴别提供依据。杂草幼苗的鉴定主要以萌发方式、子叶、初生叶（或称真叶）及上胚轴和下胚轴的形态特征为依据。幼苗有三种萌发方式：地下萌发、地上萌发和半地上萌发。单子叶植物只有一片子叶，而双子叶植物则有两片子叶。子叶的大小、形状、颜色、质地等各不相同，都有其各自的特征，可用来鉴定不同种。此外，在幼苗期间的气味、分泌物的有无等，也是一个重要的鉴定特征。

（5）种植试验对于不常见的杂草种子或不能确定的杂草种子，可播种于具有隔离条件的专用检疫苗圃，栽培观察整个植株茎、叶、花等的形态特征。这种鉴定是最准确的鉴定方法，但其最大的缺点是检疫周期较长。检验期间要严防种子传出。

（6）分子生物学技术的应用近些年，随着PCR技术的日益完善，RAPD、AFLP、SST等技术越来越多地应用到种的鉴定、亲缘关系分析等众多领域。如应用RAPD分子标记方法，对菟丝子的近缘种DNA考纹图谱进行生物多样性鉴别分析。

（7）扫描电镜观察对外部形态相似的种子，可通过光学和电子显微镜对其营养器官根和叶的内部结构以及子实颖片囊扫描观察，找出相似种子在形态解剖学方面的共性和差异，为正确鉴别种子提供依据。如丝克高粱是由假高粱（Sorghum halepense）与Sorghum arumdinaceum杂交而来，由于其生长速度快，抗逆性强，在国外被认为是一种较理想的草地与饲料植物。因其是国家禁止进境危险性有害杂草假高粱的杂交种，且与假高粱子实的外部特征非常相似，难以区分丝克高粱是否会像假高粱一样危险。通过光学和电子显微镜对假高粱和丝克高粱的营养器官根和叶的内部结构以及子实颖片的扫描观察，可对其形态、解剖特征进行系统的研究，明确其形态解剖特征。

（8）其他鉴定方法有的杂草由于真菌的内寄生而表现稳定的性状，根据这些内生菌的特征可以鉴别其近似种类：如针对毒麦的现场检验，可以根据病原菌丝在种子内的发生部位、菌丝形态结构、菌丝层的排列进行近似种的鉴定。毒麦及其变种的菌丝体较粗、菌丝层较厚；细穗毒麦的菌丝体较细、菌丝层较薄；黑麦草子实菌丝均为碎粉丝状，多花黑麦草子实内菌丝较细，且量少、多为点状；波斯黑麦草和瑞士黑麦草的子实内种皮与糊粉层之间均没有类似的菌丝。