抗体检测运用了什么免疫学原理

酶免疫分析技术是利用酶的高效催化和放大作用与特异性免疫反应结合建立的一种标记免疫技术。此法具有特异性强、灵敏度高、安全可靠、无污染等特点。

(一)分类

酶免疫分析技术按用途可分为免疫组化技术和酶免疫测定(enzyme immunoassay,EIA)两大类。EIA按抗原抗体反应是否需将结合的和游离的酶标记物分离,可分为均相酶免疫分析和异相酶免疫分析两种方法。后者又分为固相酶免疫测定和液相酶免疫测定。常用的酶免疫测定方法为固相酶免疫测定,如酶联免疫吸附试验(ELISA)。

(二)免疫组化技术

用标记物标记的抗体与组织或细胞内抗原反应,结合形态检查,对抗原进行定性、定量、定位检测的技术。现广泛应用的有酶免疫组化(辣根过氧化物酶标记)、免疫金银组化(胶体金颗粒标记)、免疫电镜技术(铁蛋白、胶体金、过氧化物酶标记)等,具有染色标本长期保存,在普通光镜或电镜下观察组织细胞的细微结构,操作简单、快速、特异性强等特点。

(三)酶免疫测定

用酶标记抗原(抗体)测定体液标本中可溶性抗体或抗原的微量分析技术。常用于标记的酶有辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AP)等。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)在酶免疫测定技术中应用最广。将已知抗原或抗体吸附于固相载体聚苯乙烯反应板表面,抗原抗体反应在固相表面进行,洗涤将固相上的抗原抗体复合物与液相中游离的成分分开。

ELISA法的技术分型:①检测抗原的技术类型有双抗体夹心法、双位点一步法、竞争法、双夹心法和桥联法;②检测抗体的技术类型有间接法、双抗原夹心法和竞争法等。