肠道标本的细菌学检验

实验四　肠道标本的细菌学检验

一、肠道标本中常见的病原体

在肠道标本中可以发现的微生物和寄生虫种类很多，分为内源性和外源性。内源性的包括正常菌群的各种厌氧菌、大肠埃希菌、变形杆菌等；外源性的大都是致病性的，涉及细菌、真菌、病毒、寄生虫等几乎所有病原性生物种类。常见的病原体有沙门菌属、志贺菌属、大肠埃希菌属、霍乱弧菌、副溶血性弧菌、弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌、梭状芽胞杆菌、结核分枝杆菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌、幽门螺杆菌（胃及十二指肠）等。

肠道标本的检验，除考虑常见的病原体外，应该考虑内源性感染的可能性。

二、肠道标本一般细菌检验程序

肠道标本一般细菌检验程序如图3－4所示。

图3－4　肠道标本的一般细菌学检验程序

三、注意事项

1．肠道内存在大量的正常菌群，除非为了正常菌群的调查和鉴定，一般分离可疑致病菌应使用选择性平板。

2．最好采集急性期和抗生素使用前的粪便标本，进行床边接种。怀疑沙门菌感染时，应在发病2周后采集。

3．除怀疑霍乱弧菌、结核分枝杆菌和菌群失调引起的腹泻外，粪便标本一般不做涂片检查。在以糖类发酵为鉴别依据的培养基上，发酵型菌落进行氧化酶试验时会出现假阴性。在选择性平板上挑取菌落时，应使用接种针从菌落中心挑取，而不应使用接种环刮取菌落。

4．沙门菌属容易丢失鞭毛抗原，此时要通过诱导使鞭毛恢复，才能鉴定。

四、病例分析

1．患者，男，8岁，出现严重腹部疼痛，大便次数不断增加，且多次便血，伴发热、呕吐，到医院急诊，检查有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿毒综合征。

（1）以上症状提示最可能的病原菌是？

（2）应及时进行什么常规的微生物学检查？

2．患者，男，67岁，取其腹泻便标本，在碱性蛋白胨水标本中37℃增菌培养箱中培养6～8h，接种在TCBS平板37℃培养箱中培养16～18h，可见黄色菌落、染色镜检见G－弯曲杆菌、单端一鞭毛。在4号琼脂上可见灰褐色菌落。

（1）最可能的病原菌是什么？

（2）为明确诊断需做哪些微生物学检查？

3．患者，女，34岁，恶心、呕吐，腹部绞痛、发热、大量水样泻。粪便标本查到可发酵乳糖的革兰阴性杆菌，此菌在伊红—美蓝琼脂上呈绿色。

（1）最可能由哪种病原体引起？

4．患者，男，6岁，因出现低热、头痛、恶心、寒战、呕吐、腹泻住院，取粪便标本进行过夜培养，查到革兰阴性杆菌，该菌有动力，不发酵乳糖，硫化氢试验阳性。

（1）以上症状提示最可能的病原菌是？

（2）为进一步确诊，应首先做什么检查？

5．患者，男，32岁。因急性腹痛2天，脓血便3天，以脓为主来就诊，大便每天10余次至数十次，有明显里急后重感，体温38℃，血压正常，白细胞增高，未见阿米巴原虫。

（1）可初步诊断为哪种疾病？

（2）采用哪种方法能进行快速诊断？

6．患者，男，30岁。病人前一天晚上在朋友处吃了海鲜，第二天突然发热，心动过速，腹部绞痛，弥漫性腹部压痛，稀水样便，无脱水征象。经粪便培养，在粪便中检出多形核白细胞，粪便在高盐培养基上分离出弧形或逗点状细菌，该菌神奈川（Kanagawa）试验阳性。

（1）最可能由哪种病原体引起？

（2）采用哪种方法能进行快速诊断？