肠杆菌科未知菌的数字编码鉴定

实验五　肠杆菌科未知菌的数字编码鉴定

一、目的要求

掌握数字编码鉴定技术的原理和结果判断。

二、实验原理

1．数字编码鉴定法。

根据临床细菌学检验的需要，优选出少数足以反映被检菌生物学特性的项目，能较准确、快速、简便地将被检菌归入一个科、属、群、种的鉴定程序，即是细菌的鉴定系统。按这定型的鉴定系统检测待检菌，将所得各项反应的结果转换成“生物型数字”，以此生物型数字查阅与本系统配套的“编码鉴定手册”（或称“检索表”），便可以从中查得待检菌的种、型鉴定结果。这就是数字编码鉴定法。

2．肠杆菌科细菌生化编码鉴定介绍。

肠杆菌科细菌生化编码鉴定采用常规生化反应11项、补充试验21项。11项常规生化反应分成4组。第1组为葡萄糖产酸（A）、产气（G）反应，实验结果组成检索部首代号（A或者AG或者O）；其余3组生化反应，按鉴定系统，每组3项试验，第一个阳性4分，第二个阳性2分，第三个阳性1分，阴性0分，每一组的得分相加，可计算得到1个数码，3组实验形成一个3位的累计数码。

根据检索部首代号，查鉴定编码表的页眉，确定待检菌所在的编码表（A/AG/O分别查表2、3和1）；根据累计数码，找到该数码对应的可能细菌名称，对待检菌进行初步鉴定。

例如，某待检菌的生化反应及结果如表2－6所示，可得到编码为A661。

经检索，找到A661对应的细菌如表2－7所示：59．11%可能为大肠埃希菌、23．50%可能为液化沙雷菌、17．15%可能为产气肠杆菌。需进一步补充实验ADO（侧金盏花醇）、MUC（黏液酸盐实验）。

表2－6　某待检菌的生化反应及结果

表2－7　数码A661的检索结果

三、实验内容及方法

1．材料。

待测菌、肠杆菌科细菌生化鉴定微量管。

2．方法。

（1）选择合适的微量鉴定系统。

未知菌革兰染色、氧化酶实验，根据形态、简单的生化反应，初步鉴定，选择合适的微量鉴定系统。

（2）制备菌悬液。

挑取待检菌的单个菌落悬于1mL无菌的生理盐水中，调整菌液浓度为0．5麦氏比浊度。

（3）接种、培养。

按说明书要求，将待测菌接种至各种生化微量管中，37℃培养箱中培养18～24h。

注意：糖发酵管倒置观察气泡、脱羧酶及对照管要加液体石蜡约0．5cm高度。

（4）生化反应结果观察。

根据不同生化反应实验的结果判断标准观察、记录实验结果。

（5）编码及检索。

根据生化反应结果，给出相应数值，进行编码。从肠杆菌细菌生化鉴定编码册中查找出相应的菌，并给出可信度（阳性概率）或补充实验。

3．结果记录及分析。

（1）生化反应结果。

表2－8　肠杆菌科未知菌的数码鉴定微量反应结果

（2）检索结果。

根据上述生化反应得到的编码为______，经检索在______页，该检索代号所对应的为______菌，阳性概率为______%，补充实验______。

（3）结论。

待测菌××，初步鉴定可能为______菌，概率是______，需要做______补充试验。

四、思考与讨论

肠杆菌科未知菌数字编码鉴定中，概率与可信度的关系如何？