肠杆菌科常规鉴定

三、肠杆菌科常规鉴定

1．标本采集　肠外感染采集血液、中段尿、痰液、伤口分泌物等;肠道感染采集新鲜粪便黏液、脓血部分，及时送检。如不能及时送检，应将粪便置于运送培养基或甘油缓冲盐水中，冷藏待检。

2．检验方法与鉴定

(1)涂片染色与镜检:肠道杆菌科细菌的形态与染色性相似，根据形态与染色性难以相互鉴别。

(2)分离培养:①血液或穿刺液等采自无菌部位的标本，需肉汤增菌后接种血平板。②尿、脓汁等含有混杂细菌的标本接种于选择性培养基，如麦康凯琼脂和伊红亚甲蓝(Eosin－Methylene－blue，EMB)平板，以提高肠杆菌科细菌的分离率。③粪便标本:常用的分离培养基有非选择性培养基(血平板)、弱选择鉴别培养基(MAC/EMB/中国蓝平板)和针对沙门菌和志贺菌的强选择鉴别培养基，如SS(Salmonella－Shigella)琼脂等。

(3)鉴定:肠杆菌科主要依据生化反应和血清学进行鉴定。①科的鉴别:除肠杆菌科外，革兰阴性杆菌还包括弧菌科、非发酵菌和巴斯德菌科，因此肠杆菌科的鉴定首先应注意与这些细菌的鉴别，氧化酶阴性基本可将其区别开来，见表9－3。②初步分群(组):根据苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐利用试验(也可用V－P试验)，可将肠杆菌科14个菌属分为三个组，见表9－4。③属间鉴别:很多临床实验室习惯根据克氏铁双糖铁琼脂(KIA)、动力－吲哚－脲酶(M IU)培养基的试验结果将肠杆菌初步分属，详见表9－2。④属内及种的鉴定:用系列生化反应和诊断血清进行最后鉴定。临床常直接用商品化微生物鉴定试剂盒或自动鉴定和药敏仪得到属、种的鉴定结果。

表9－3　肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别

*，不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌氧化酶试验为阴性。

表9－4　肠杆菌科初步分群