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宋一璇科研组心脏传导系统的检查法(简称宋氏检查法)

时间:2022-04-16 理论教育 版权反馈
【摘要】:研究心脏传导系统形态学变化,以往的办法是在传导组织解剖范围内共取十余块组织,各蜡块连续切片数百乃至上千张,片经HE染色加特殊染色镜检。宋一璇带领科研组对500多例心脏标本进行比较,改进了前人纵切取材法,并建立了一种横切取材法。若研究心传导系统的形态学最好采用纵切取材法,而研究冠心病窦房结动脉病变时则选用横切法为佳。

二、宋一璇科研组心脏传导系统的检查法(简称宋氏检查法)

研究心脏传导系统形态学变化,以往的办法是在传导组织解剖范围内共取十余块组织,各蜡块连续切片数百乃至上千张,片经HE染色加特殊染色镜检。这种方法工作量大,难以常规开展CCS检查。

宋一璇带领科研组对500多例心脏标本进行比较,改进了前人纵切取材法,并建立了一种横切取材法。所谓纵切法,即与SAN,AVN的长轴平行取材制作切片的方法;横切法,即与SAN,AVN的长轴相垂直取材制作切片的方法。这两种取材方法并用,由于定位标志明显,故均能准确切取到心传导组织,且工作量较传统取材法大为减少,可作为CCS常规检查。

纵切法:①组织学显示结细胞围绕结动脉成层排列,细胞(起搏细胞及移行细胞)较工作心肌体积小,略弯曲,HE染色胞浆色淡,排列致密,与周围组织分界清;②纵切可在一张玻片上观察到AVN,SAN的全貌,便于进行形态学分析;③对操作技术要求较高。

横切法:①因SAN,AVN长轴与横轴之比均为3~5倍,选用横切法,较易切取到传导组织;②光镜下显示的特殊心肌细胞为横断面,不易进行细胞形态学观察。本法多用于观察沿AVN,SAN长轴走行的结动脉之病变。

每种方法各具其优缺点。若研究心传导系统的形态学最好采用纵切取材法,而研究冠心病窦房结动脉病变时则选用横切法为佳。

(一)一般检查

心脏标本先称质量,按血流方向依次剪开右心房→右心室→左心房→左心室;测量左、右心室肌厚度,各瓣膜周径;在各心腔内放入少量棉球,便于保持原形;10%中性甲醛液固定4~12 h取材。

(二)纵切取材法

窦房结:以上腔静脉(SVC)、右心房(RA)、右心耳嵴(RAA)及界沟(AA)所示为SAN的定位标志。①以右心耳嵴为起点,平行于上腔静脉切第1刀;②沿界沟下缘0.3 cm与其平行切第2刀;③与第1刀平行,向后左方移动1.5~2 cm切第3刀;④平行于第3刀,上移0.7 cm切第4刀(图15-18)。切取一长条状组织块,沿纵轴平分成两小块,相向包埋(以大头针或切一小缺口指示包埋面)(图15-19)。

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图15-18 SAN纵切取材示意图

SAN取材定位标志:SVC为上腔静脉,RA为右心房,RAA为右心耳嵴,LA为左心房;方框内为要取的SAN组织所在位置

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图15-19 SAN纵切取材示意图二

1为按图15-18切取SAN所在组织;2,3为沿图1示虚线切开后的两块组织

房室结:AVN的定位标志有卵圆窝(FO)、冠状窦口(CS)、室间隔膜部(MS)及三尖瓣隔侧瓣(TV)。①沿膜部后缘纵切第1刀;②沿卵圆窝下缘与膜部顶端的连线切第2刀;③沿冠状窦口下缘与膜部底端下移0.5 cm的连线切第3刀;④沿冠状窦口前缘距第1刀1.2~1.8 cm并与之平行切第四刀(图15-20左)。切取一类正方形组织块,按等分水平切2刀(图15-21左)。上面第1块以下缘为包埋面,下面2块则以其中线为包埋面,相向包埋。

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图15-20 AVN纵切取材示意图一

AVN及HB取材定位标志:FO为卵圆窝,CS为冠状窦口,MS为室间隔膜部,TV为三尖瓣隔侧瓣;左侧方框示AVN组织所在位置,右侧方框示HB所在位置

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图15-21 AVN纵切取材示意图二

按图15-20定位标志切取到的AVN及希氏束(HB)所在组织。然后再按图中虚线切开

房室束及左、右束支:主要以室间隔膜部为定位标志。①将切AVN第1刀(膜部后缘)下延;②沿膜前缘,与第1刀平行切第2刀;③平膜部顶端横切第3刀;与第3刀平行,下移1.5~1.8 cm切第4刀(图15-22右)。切取一宽约0.5 cm长条状组织,沿中线平分成2小块,以靠膜后缘为包埋面,按同一方向包埋。

固定、切片、染色:将切取的各组织块(共7块),认准其包埋面,再置10%中性甲醛液固定12~20 h,常规切片,每个蜡块隔50 μm切1片,厚4~5 μm,捞取5张盖玻片,每例心传导组织共切35张片。HE染色,部分进行Masson氏染色、Verhoeff弹力纤维染色及网状纤维银染法,光学显微镜下观察。

(三)横切取材法

窦房结:方法基本与纵切法一样。将切取的长条状组织,横断均分成4~5小块,按同一方向包埋(图15-23)。

房室结:将切取的类似正方形组织块,纵切2刀均分成3小块,按同一方向包埋(图15-24)。

房室束:同纵切取材法(图15-24)。

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图15-22 HB纵切取材示意图

按图15-21的HB组织,沿虚线切开后可将HB分为左、右束支两部分

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图15-23 SAN横切取材示意图

切取SAN时心脏定位标志(SVC为上腔静脉,RA为右心房,RAA为右心耳嵴);先按方框完整切取组织,再按1,2,3线横切

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图15-24 AVN,HB横切取材示意图

切取AVN,HB的定位标志:FO为卵圆窝,CS为冠状窦口,MS为室间隔膜部,RA为右心房;先按左、右方框完整切取组织,再按1,2线横切AVN所在组织,按3线横切HB所在组织

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