固体培养基细菌接种方法

不同的细菌对营养物质、能量及环境条件的生理要求不同，用人工方法提供细菌生长繁殖所需要的各种条件，可进行细菌的人工培养。根据细菌对营养物质的需要，经过人工配制适合不同细菌生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质称为培养基。培养基的主要用途是能促使细菌生长与繁殖，可用于细菌纯种的分离、鉴定和制造其制品等。根据细菌的种类和培养的目的，可配制不同种类的培养基。

常用的培养基介绍如下。

（一）根据培养基物理状态分类

1．固体培养基在液体培养基中加入质量分数为2%～2．5%的琼脂，使培养基凝固呈固体状态。固体培养基可用于菌种保藏、纯种分离、菌落特征的观察以及活菌计数等。

2．液体培养基　在配制好的培养基中不加琼脂，即为液体培养基。常用于增菌及生化试验等。

3．半固体培养基　在液体培养基中加入少量（0．3%～0．5%）的琼脂，使培养基呈半固体状，多用于细菌有无动力的检查。

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细菌培养　德国学者郭霍（Robert Koch，1843—1910年）创用固体培养基，将细菌从环境或病人排泄物等标本中分离出来进行纯培养，利于该技术对各种细菌做分别研究。在19世纪的最后20年中，大多数传染病的病原体由郭霍和在他带动下的一大批学者发现并分离培养成功，因此他被称为微生物学的奠基人之一。

（二）根据培养基的用途分类

1．基础培养基　这种培养基的组成物质是能满足一般细菌生长繁殖所需要的营养物质，可供培养一般细菌使用。如营养琼脂是培养细菌的基础培养基。

2．营养培养基　在基础培养基中加入一些额外的营养物质，如加入血液、血清、葡萄糖、酵母浸膏等，可使营养要求较高的细菌生长。

3．选择培养基　在培养基中加入某些化学物质，有利于需要分离的细菌生长，抑制不需要的细菌。如培养沙门菌的SS培养基可以抑制大肠埃希菌的生长。

4．鉴别培养基　用于培养和鉴别不同细菌种类的培养基。如糖发酵培养基，可观察不同细菌分解糖产酸产气情况；用醋酸铅培养基可以鉴定细菌是否产生硫化氢等。

5．厌氧培养基　供专性厌氧菌的分离、培养和鉴别用的培养基，如疱肉培养基。

（三）细菌在培养基上的生长现象

细菌在固体培养基上生长，由单个菌细胞分裂繁殖，形成肉眼可见的堆集物，称为菌落；许多菌落融成一片称为菌苔。在平板培养基上孤立生长的一个菌落，往往是一个细菌生长繁殖的结果，因而平板培养基可以用来分离纯种细菌。各种细菌菌落的大小、形态、透明度、湿润度、表面光滑或粗糙、有无光泽等随菌种不同而各异，这些特征在细菌鉴定上具有重要意义。

在液体培养基中生长的细菌，有的使清亮的培养基变得均匀浑浊；有的可在液体表面形成菌膜；有的则沉淀生长如絮状或颗粒状。临床上，注射药剂如有此三种现象之一，则多为细菌污染，不得再使用。

有鞭毛的细菌在半固体培养基中，沿穿刺线向周围扩散呈放射状、羽毛样或云雾状浑浊生长。无鞭毛的细菌在半固体培养基中，沿穿刺线呈明显的线状生长。因此可用半固体培养基穿刺培养，检查细菌的运动力。