1. 目的
有效地指导分泌物细菌培养标本的采集、接收及保存，使培养结果尽量不受干扰因素影响，保证检测结果准确可靠。
2. 适用范围
适用于分泌物细菌及真菌培养的标本的采集、接收及处理。
3. 人员职责
3.1 分泌物液标本由临床医护人员采集，检验人员有义务向临床提供各标本采集的类型、标本量、保存条件、注意事项、生物参考区间及临床意义等。
3.2 分泌物标本的运送应由护士、临床专职外送卫生员、检验人员进行运送及标本物流传输装置自动传送。
3.3 检验后分泌物标本由检验科卫生员进行高压消毒处理后送医院垃圾处理站。
4. 工作程序
4.1 患者准备及原始标本识别
4.1.1 患者分泌物采集前，应掌握好采分泌物时机，对有感染症状需要明确病原学诊断者及时进行细菌及真菌培养检查。应在患者抗菌药物治疗前采集。
4.1.2 分泌物标本由临床医生采集，护士遵照医嘱准备好标本采集前所用的容器以及消毒器材。首先确认患者姓名，并将患者一般信息的条码标识写在（贴于）分泌物送检所用容器上。
4.1.3 采分泌物前应向患者做适当解释，以消除疑虑和恐惧。如遇患者采分泌物后发生晕厥，可让患者平卧，通常休息片刻即可恢复。必要时可嗅芳香氨酊，针刺或指掐人中、合谷等穴位。
4.1.4 原始标本以“电子申请单的条码号”为唯一标识。
4.2 申请单的填写、处理及保存
临床医生在检验申请单填写时，应采用计算机程序进行申请，填写完整，受检者姓名、性别、年龄、病案号/门诊号、病区/床位、样品号、标本类型、医生姓名、临床诊断、申请检测项目、标本采集时间及特殊说明。
临床医护人员：根据检验申请单中的检验项目，做好标本采集的准备。
检验人员：必须在收到临床医生电子打印的检验申请单时，扫描并核对信息，正确方可接收标本并实施相应的检验。
检验申请单信息电子保存至少2年。
4.3 分泌物培养标本采集的方法、容器、类型和量
4.3.1 分泌物液标本采集部位
脓液： 伤口或其他有脓液分泌的部位
咽拭子培养、咽拭子涂片：咽后壁或腭垂的后侧
鼻拭子：咽后壁
口腔黏膜涂片：口腔
生殖道分泌物：男性：尿道；女性：阴道及宫颈
4.3.2 采集方法
脓液及创面分泌物标本的采集：应尽量揩去病灶表面的污染菌，以免影响培养结果。用无菌棉拭采取脓液及病灶分泌物于无菌培养管内送检，亦可用无菌手术采取组织碎片送检。脓样标本，最好用无菌注射器，抽取脓液，如行切开排脓亦可以用无菌棉拭子采取标本送检。
扁桃体脓性分泌物：患者需先用清水漱口，由检查者将舌向外拉，将咽拭子越过舌根涂抹扁桃体上的脓性分泌物，置灭菌管内送检。
咽拭子的留取：通常采用无菌棉拭子。采集前患者应用清水反复漱口，由被检查者将舌向外伸，使硬腭尽可能向外牵引，检查者将棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，但拭子要避免接触口腔和舌黏膜。放标本进入试管中运输。对于鼻拭子，先用无菌盐水湿润的拭子插入鼻腔约2 cm，再轻轻旋转取样。
鼻拭子：鼻拭子通过鼻腔进入咽后壁，慢转动拭子5 s以吸收分泌物。移去拭子，放标本进入试管中运输。
口腔黏膜涂片：直接刮取口腔内溃疡部位或周边组织，放标本于无菌容器中运输。
生殖道分泌物：用于支原体检查必须在用药前采集标本，支原体对细胞表面有很强的亲和力，应尽可能多收集细胞，标本采集后应尽快接种，不可在室温或普通冰箱久存，以免拭子干燥而致使支原体活力降低甚至死亡。男性：用男性无菌拭子在前尿道1～2 cm处取尿道分泌物，根据病情需要，可以取前列腺按摩液、精液。女性：采集宫颈分泌物，标本采集时应先擦去宫颈口多余黏液，再用另一支拭子在宫颈管内1～2 cm处取宫颈分泌物。取材时，要在宫颈内旋转并至少停留20 s，以便获得较多的细胞。如果必须用尿液作支原体培养，可留取清晨中段尿10～20 ml，高速离心后，取沉淀物接种，但尿液支原体培养的阳性率明显低于尿道（或宫颈）分泌物。
用于沙眼衣原体检测：男性尿道样品，尿道用拭子或细胞刷可用于尿道取样，病人在取样前至少1 h内不要小便。将拭子或细胞刷插入尿道2～4 cm，旋转3～5 s后取出。放入无菌管中，立即送检。女性使用消毒宫颈拭子，在取样前用另外的拭子或者棉球将宫颈外区域的黏液抹去，将取样拭子插入宫颈管内通过鳞柱状上皮交界处，直到几乎拭子头已经看不到。旋转拭子15～20 s取出，不要碰到宫颈外及阴道壁。这样能保证得到更多的柱状上皮细胞。宫颈样品也可以用细胞刷收集。清洁宫颈口外后，将细胞刷插入宫颈管，通过鳞柱状上皮细胞交界处，停留2～3 s，旋转细胞刷两圈后取出，注意不要碰到阴道壁。采集后，直接放入无菌管中，立即送检。
用于细菌性阴道病检测 ：用阴道窥器扩张后，用棉拭子采集宫颈后穹隆的分泌物。取样后得立即送检，时温保存不得超过2 h。
涂片找淋球菌：男性在清洗龟头部后，以碘伏或其他非刺激性消毒剂消毒后，挤出分泌物立即以无菌棉拭子采取，尽快送检，或以专用的细拭子插入尿道口1～2cm旋转采取。如疑前列腺炎、精囊炎或慢性淋病应先按摩前列腺，以无菌手续自尿道口采取前列腺液送检。取样后置于无菌容器内立即送检女性：成年女性自宫颈采取标本，在扩阴器的支持下，选取有炎症或分泌物部位，先以无菌棉拭子拭去浅层分泌物，再另一拭子取分泌物送检。
4.3.3 采集容器：密封无菌盒，装有无菌拭子的密封试管，无菌玻片。
4.3.4 注意事项：严格无菌操作，在分泌物培养的全过程，从皮肤消毒、标本采取、运送、分离移种等，皆应十分注意无菌操作。严格防止标本次序混乱，按一份一单，并将瓶上的可撕条码贴在相应化验单上。
4.4 安全处置
4.4.1 器具
4.4.1.1 不把用过的器具传递给别人。
4.4.1.2 严格器材专人专用，不可反复使用避免交叉感染。
4.4.1.3 勿将废弃物放在儿童可以接触到的地方。
4.4.2 废弃物
4.4.2.1 处理废弃物必须采用适当的防护设施，常用的防护设施包括乳胶手套、口罩、防护眼镜、隔离衣等。
4.4.2.2 没有被污染的废弃物可以按一般性废弃物处理（装入黑色袋）；污染的废弃物可以按医疗废弃物（感染性废弃物，装入黄色袋）处理。
4.4.3 意外情况的处理
4.4.3.1 针刺和切割伤：皮肤有损伤或针刺时，用大量的水冲洗；然后用灭菌生理盐水彻底清洗伤口处，并用75%酒精溶液消毒；最后用防水的敷料包扎伤口。
4.4.3.2 眼睛、黏膜和皮肤污染的处理：如果被分泌物液或体液喷溅眼睛、黏膜，立即用大量清水或生理盐水冲洗15～20 min；如果被分泌物液或体液喷溅皮肤，用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，再用75%酒精或0.5%碘伏进行消毒。
4.4.3.3 溢出物的处理
4.4.3.3.1 处理溢出物必须采用适当的防护设施，常用的防护设施包括乳胶手套、口罩、防护眼镜、隔离衣等。
4.4.3.3.2 环境被患者标本污染时，用卫生纸将溢出物吸收，然后用0.2%过氧乙酸溶液或次氯酸钠（有效氯约5 000 mg/L）溶液消毒，必要时采用紫外线对环境进行消毒处理。
4.4.3.3.3 衣物被患者标本污染时，尽快脱掉污染衣服以防止感染物触及皮肤并防止进一步扩散，将已污染的衣物进行适当的消毒处理。如果被患者标本污染的衣服触及皮肤时,应尽快脱掉污染衣服并进行淋浴。
4.5 分泌物标本的运送
4.5.1 门诊患者的分泌物液标本由患者本人或家属运送；住院患者的分泌物液标本由护士、临床专职外送卫生员运送。
4.5.2 送检地点：送至临床检验医学中心微生物室（门诊楼四层东侧），夜间送到临床检验医学中心急诊室（门诊楼一层）。
4.5.3 标本采集后立即送检，一般要求分泌物标本传输不超过2 h，常温储存不超过24 h。
4.5.4 分泌物液标本的运送必须保证运送过程中的安全，防止溢出。标本溢出后，应按4.4.3.3处理。
4.6 分泌物标本的接收与拒收的标准
4.6.1 实验室接收合格分泌物标本
4.6.1.1 检验申请单应为电子格式，内容必须齐全，分泌物液标本容器标识应符合本程序4.2要求，标本标识应与检验申请单的相应内容完全一致。
4.6.1.2 分泌物标本采集后应立即送检，不能及时送检的标本采取保存措施，参照本程序4.5.3。
4.6.2 实验室拒收分泌物标本的标准
4.6.2.1 如果到达实验室的标本可能经过了不恰当的选择、采集、转运和储存，这种情况等同于对标本失去控制。这些标本的处理和结果可能会提供错误的信息和不恰当的治疗。因此，实验室必须严格标本拒收标准，并给予合适的处理。
4.6.2.2 申请单信息不全或错误：主要信息错误如患者姓名应重新留取，其他信息缺失应及时电话联系要求补全。
4.6.2.3 缺乏唯一识别码的标本，如没有标签或贴错标签的标本，应该立即与医生或护士联系。条码使用过或条码无信息的标本重送。
4.6.2.4 标本质量不合格：微生物检测标本来源不符合或存在污染，如呼吸道标本扁平上皮细胞较多；分泌物标本凝固或标本量过少等，均应重新送检。在一些特殊情况下，即使所提供的标本质量不合格，也必须进行处理，例如，一个疑难病症或传染性疾病的会诊，无菌体液可能代表严重的或对生命有威胁的疾病，应立即恰当处理，并标明。
4.6.2.5 没有提供检测标本所适宜的条件或运送容器，应及时与临床联系，阐明检测要求，指出不符合的地方。并要求一个能满足检测条件的标本。
4.6.3 实验室接收特殊不合格分泌物标本的说明
在下列情况下：如标本量本来较少，很难采集等情况，分泌物标本不足，必须与临床医生联系，经临床医生同意后，临床检验科方可接受分泌物标本并检验，并在检验结果报告单中注明。
4.6.4 拒收标本及时通知临床医生或护士，但原始标本由检验科保存处理，其他人员未经允许不得取走。
4.7 生物参考区间及临床意义
咽拭子培养：正常情况下咽拭子培养：可有甲型溶血性链球菌、奈瑟菌生长，报告无致病菌生长。
咽拭子涂片：涂片未见真菌孢子及菌丝。
鼻拭子培养：甲型溶血性链球菌、奈瑟菌为无致病菌生长。
口腔黏膜涂片：涂片未见真菌孢子及菌丝。
支原体（Uu/Mh）：解脲脲原体培养阴性，人型支原体培养阴性。
沙眼衣原体：沙眼衣原体阴性。
涂片找淋球菌：涂片未见革兰阴性双球菌，淋球菌培养阴性。
临床意义：
咽拭子培养：阳性是判断上呼吸道感染的依据，根据细菌种属的不同进行相应的具体诊断。
咽拭子涂片：阳性为可见孢子及菌丝提示口腔内真菌感染。
鼻拭子培养：阳性是判断上呼吸道感染的依据，根据细菌种属的不同进行相应的具体诊断。
口腔黏膜涂片：阳性为可见孢子及菌丝提示口腔内真菌感染。
支原体（Uu/Mh）：阳性结果指示泌尿生殖道支原体的存在。
沙眼衣原体：阳性结果指示沙眼衣原体的存在。
涂片找淋球菌：阳性结果指示淋病感染。
4.8 已检标本存放
检查过的分泌物细菌培养标本不保存。
4.9 附加检验项目及时间限制
分泌物细菌培养标本可附加真菌培养检验项目。
4.10 因分析失败而需再检验标本的处理
分泌物细菌培养因仪器的原因（如温控器误判试剂温度过低,二氧化碳量偏低），或者试剂盒过期等原因导致检测不出结果或假阳性，应先检查仪器及试剂失误原因，及时纠正后再进行检测。
4.11 检查后分泌物标本及废物的处理
检验过的分泌物细菌培养标本及检验过程中使用的各种废物，按《废物处理制度》进行处理。
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