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立克次体及其检验

时间:2022-03-16 理论教育 版权反馈
【摘要】:斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X株有共同的抗原,因此临床上常用后者代替前者进行非特异性凝集反应,这种交叉凝集试验称为外斐反应,用于立克次体病的辅助诊断。IFA试验方法敏感,所需时间短,材料少,一般滴度在1∶16或以上为阳性,单份血清滴度≥1∶128或有4倍增长者可作为立克次体病的现症诊断。

1.共同特征 是一类寄生于细胞内的原核微生物,共同特征:①大多为人畜共患病原体,引起人类发热及出血性疾病;②以节肢动物为传播媒介或宿主;③革兰阴性杆菌;④专性活细胞内寄生,极少数除外;⑤对多种抗生素敏感,但磺胺类药物不敏感;⑥菌体内同时含有DNA和RNA;⑦以二分裂方式繁殖。

2.生物学特性

(1)形似小杆菌,有不同的多形性(球杆状、丝状等),无鞭毛或荚膜,革兰染色不易着色,Giemsa染紫红色,两端浓染,Macchiavello染红色,Giménez染红色(背景绿色),恙虫病立克次体则不同,Macchiavello染蓝色,Giménez染暗红色(背景绿色)。

(2)抗原组成构造:有两类特异性抗原:群特异性和种特异性,前者为可溶性抗原,后者为颗粒性抗原。斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X株有共同的抗原,因此临床上常用后者代替前者进行非特异性凝集反应,这种交叉凝集试验称为外斐反应,用于立克次体病的辅助诊断。

(3)培养特性:方法有鸡胚卵黄囊培养、细胞培养,初代分离可用豚鼠等动物接种,汉赛巴通体用新鲜巧克力平板接种,35℃、5%CO2培养2周左右才长出菌落。

(4)致病性:发热、头痛、皮疹及中枢神经系统症状为立克次体病的特征。立克次体斑疹伤寒群主要分为普氏立克次体及莫氏立克次体,前者常以人的体虱为传播媒介,引起人-人传播的流行性斑疹伤寒(或称虱传斑疹伤寒),后者的宿主是鼠类,传播媒介是鼠蚤(虱),引起地方性斑疹伤寒(或称鼠型斑疹伤寒),恙虫病立克次体通过恙螨叮咬传人,引起恙虫病。

3.微生物学检验

(1)标本的采集:发病初期、急性期的病人血液较易检出病原体,发病一周内并在使用抗生素前采集患者血液。血清学标本一般采集3份,分别取自病程早期、病后10~14d及病后21~28d,如患者已使用抗生素,需采集4份标本。

(2)标本直接检查:用荧光抗体染色或常规染色镜检,或采用PCR技术和核酸探针检测。

(3)斑疹伤寒、恙虫病和Q热病原体分离多用动物(鼠)接种,汉赛巴通体用人工培养基,埃立克体用细胞培养。

(4)目前检测的常用方法有间接免疫荧光(IFA)试验及ELISA间接法。IFA试验方法敏感,所需时间短,材料少,一般滴度在1∶16或以上为阳性,单份血清滴度≥1∶128或有4倍增长者可作为立克次体病的现症诊断。

(5)凝集试验分为特异性凝集和非特异性凝集试验两种:①特异性凝集试验:微量血凝试验(MA):达1∶8以上者为阳性,间接血凝试验(IHA):达1∶50以上者有诊断价值,乳胶凝集试验(LA):结果与IHA结果相吻合。②非特异性凝集试验(外斐试验):缺乏敏感性和特异性,一般血清滴度达1∶160为阳性,病程中双份或多份血清试验,效价至少有4倍增长才有诊断意义。流行性斑疹伤寒:OX4+19OX2OXK;地方性斑疹伤寒:OX4+19OX2 OXK;斑点热:OX4+19OX3+2OXK;恙虫病:OX19OX2OX4+K;腺热:OX19OX2OX2+K

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