标样浓度和在线仪器检测浓度

分光光度法的理论依据是郎伯－比耳定律： 溶液中的物质在光的照射和激发下， 产生对光吸收的效应。 但物质对光的吸收是有选择的， 各种不同的物质都有其各自的吸收光谱， 所以， 根据定律， 当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时， 溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度c（g／L） 或液层厚度b（cm） 成正比， 其定律表达式为：

A＝abc

其中， a——比例系数。

当c的单位为mol／L时， 比例系数用ε表示， 称为摩尔吸光系数， 此时A＝εbc， 其单位为L·mol－1·cm－1，它是有色物质在一定波长下的特征常数。定义T（透光率）＝I／I0，I0为入微光强度， I为透射光强度， 则

A（吸光度）＝－lg T

目前生产出来的722型分光光度计的一般操作步骤如下：

1. 预热仪器

将选择开关置于 “T”， 打开电源开关， 使仪器预热20min。 为了防止光电管疲劳， 不要连续光照， 预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开， 使光路切断。

2. 选定波长

根据实验要求， 转动波长手轮， 将其调至所需要的单色波长。

3. 固定灵敏度挡

在能使空白溶液很好地调到 “100％” 的情况下， 尽可能采用灵敏度较低的挡， 使用时， 首先调到 “1” 挡， 灵敏度不够时再逐渐升高。 但换挡改变灵敏度后， 须重新校正“0％” 和 “100％”。 对于选好的灵敏度， 实验过程中不要再变动。

4. 调节T＝0％

轻轻旋动 “0％” 旋钮， 使数字显示为 “00.0” （此时试样室是打开的）。

5. 调节T＝100％

将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂） 的比色皿放入比色皿座架中的第一格内， 并对准光路，把试样室盖子轻轻盖上，调节透过率“100％” 旋钮，使数字显示正好为“100.0”。

6. 吸光度的测定

将选择开关置于 “A”， 盖上试样室盖子， 将空白液置于光路中， 调节吸光度调节旋钮，使数字显示为 “.000”； 将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其他格内， 盖上试样室盖， 轻轻拉动试样架拉手， 使待测溶液进入光路， 此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值； 读数后， 打开试样室盖， 切断光路。

重复上述测定操作1～2次， 读取相应的吸光度值， 取平均值。 然后进行下述操作。

7. 浓度的测定

将选择开关由 “A” 旋置 “C”， 将已标定浓度的样品放入光路， 调节浓度旋钮， 使得数字显示为标定值； 将被测样品放入光路， 此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。

8. 关机

实验完毕， 切断电源， 将比色皿取出洗净， 并将比色皿座架用软纸擦净。