饲料中能量的测定

1　材料与方法

1．1　实验动物来源与驯化

实验用半滑舌鳎幼鱼购于烟台海阳黄海水产有限公司，体重9．73±0．86g，个体健壮无病，活力强。

鱼进入实验室后，暂养于大型圆形玻璃钢水槽（1　000L）内，所用海水为砂滤水，盐度29～31，pH值8．0，氨态氮＜0．19mg／L，水温22℃。在该条件下驯化、暂养7d。采用控温仪（WEIPRO MX300IC）控制水温，以2级精密温度计进行校正，使其波动在±0．1℃以内。

每天早晚两次投喂配合饲料（北京日清昊科技有限公司），其在主要生化组成见表1。摄食结束后1h吸底换水，换水率100%／d。光照时间设为14L：10D，24h不间断充气。

表1　饲料的能值及生化组成Tab．1 The energy content and composition of the artificial pellet（%）

1．2　实验设计与管理

本实验设置5个不同的投喂处理，其中1个处理持续投喂，设为对照组（C），另外4个处理是“饥饿—投喂—再饥饿—再投喂”的循环投喂处理组：

S2F4组：饥饿2天，投喂4天，重复12次。

S4F8组：饥饿4天，投喂8天，重复6次。

S8F16组：饥饿8天，投喂16天，重复3次。

S12F24组：饥饿12天，投喂24天，重复2次。

每个处理设5个重复，实验时间72天。

暂养结束后，实验鱼饥饿24h使其肠内排空。然后挑选健壮活泼、大小接近的个体，称重后放入相应水族箱（规格为55cm×30cm×35cm）内进行实验，每个水族箱内各放养5尾幼鱼。同时，取25尾鱼称重后放入－70℃冰箱保存，作为初始样品。水族箱水体的温度由控温仪（WEIPRO MX300IC）控制，水温波动控制在±0．1℃以内。

实验期间，根据实验设计每天08：00和19：00分2次投喂配合饲料，每次投喂前称量饲料并记录（0．000　1g），根据残饵剩余情况适时调整投喂量。每天在投喂前40min以及摄食

1h后收集粪便，并于70℃下烘干保存。

实验于2008年6月17日开始，到2008年8月27日结束。实验用鱼饥饿24h后，使其肠内排空，然后测定呼吸代谢，再称量并全部取样用于体成分和能值测定。

1．3　样品测定

实验过程中所取鱼体、粪便以及饲料样品均于70℃下烘干后称重、研磨，然后进行相关分析。其中，鱼体和饲料中蛋白质含量由氮含量×6．25得到，而氮含量用Vario ELⅢ型元素分析仪测定，脂肪测定采用乙醚抽提法，灰分测定采用马福炉焚烧法（550℃）。鱼体、饲料和粪便能值利用PARR1281型氧弹式热量计测定。水中溶解氧采用YSI－5000测定，NH₄^＋—N浓度用次溴酸钠氧化法测定。

1．4　能量收支计算

半滑舌鳎幼鱼的摄食（C）、生长（G）、呼吸（R）、粪便（F）和排泄（U）的能量符合下列关系［22］：

C＝G＋F＋U＋R

其中，C为摄入的饲料能值，G为生长能，F为排粪能，U为排泄能，R为代谢能。排泄能以下式计算：

U＝（CN－GN－FN）×24　830

式中，CN为摄食食物中所含的氮，GN为鱼体生长增加的氮，FN为粪便中所含的氮，24　830为每克氨氮的能值（J·g^－1）^［23］。预实验表明，半滑舌鳎的主要排泄物为氨氮，尿素排泄量很小，对实验结果没有影响，因而在本研究中忽略不计。呼吸耗能由能量收支式R＝C－G－F－U求出。

1．5　数据的计算与处理

实验期间半滑舌鳎幼鱼特定生长率、饲料转化率、消化率和摄食率计算如下：

SGRw＝100×（lnWt－lnW0）／t

SGR_e＝100×（lnE_t－lnE₀）／t

FCEw＝100×（Wt－W0）／Cw

FCE_e＝100×（E_t－E₀）／C_e

ADRw＝100×（Cw－Fw）／Cw

ADR_e＝100×（E_t－E₀）／E_t

FR＝100×Cw／（t×（Wt＋W0）／2）

其中，SGR_w和SGR_e分别为以重量和能量表示的半滑舌鳎幼鱼的特定生长率，FCE_w和FCE_e分别为以重量和能量表示的饲料转化率，ADRw和ADR_e分别为以重量和能量表示的消化率，FR为摄食率，Cw和C_e分别为以重量和能量表示的半滑舌鳎幼鱼的摄食量，Wt和W0为半滑舌鳎幼鱼的末体重和初体重，E_t和E₀为以能量表示的末体重和初体重，t为实验时间。

所得数据用单因素方差分析（ANOVA）及Duncan多重比较进行处理，以P＜0．05作为差异显著水平。