第二节 培养基的制备
一、什么是培养基
培养基是指盛装于一定的容器内，并经消毒灭菌后为食用菌提供营养条件的基质物。不同菌种类型通常要配备不同的培养基。
二、培养基的制作
（一）母种培养基的制作
1.马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）
（1）配方。马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂18克，水1000毫升，pH值5.5～6.5。
（2）调制。取新鲜马铃薯洗净，去皮，切成薄片，称取200克放入烧杯或铝锅内，加水1000毫升，加热煮沸约30分钟使马铃薯片酥而不烂，然后用三层干净的纱布过滤取其汁液，在汁液中加入琼脂，继续加热并用玻璃棒搅拌，避免焦锅，待琼脂溶化后加入葡萄糖，搅拌使其溶解，最后用热水定容到1000毫升，并测试、调整其pH值。接着趁热将营养液分装于试管内，装入量为试管长度的1/5，不要使营养液黏附在试管口上，要干净利落。分装后每个试管口塞上棉塞，松紧适宜。按10支一捆扎住，并用牛皮纸包住管口棉塞，直立放入高压锅内灭菌。
（3）高压锅灭菌的操作步骤。
①向锅内加水到水位标记处，首次使用要进行测试，加水过少易造成干锅出事，过多又会打湿棉塞。
②将需要灭菌的物品放入高压锅内，不能挤压，并且上部要留出1/3的空间。
③盖上锅盖，对角线同时拧紧锅盖上的螺栓，然后关闭锅盖上的阀门。
④通电或供火加热，使锅内压力升高，当压力达到0.5千克/平方厘米时，缓慢打开放气阀，排尽锅内冷空气，使压力降为零。一定要排尽锅内空气，否则灭菌就不彻底。
⑤继续加热，当压力上升至1.1～1.2千克/平方厘米时，开始计时，维持20～30分钟。不同的灭菌物品要求的灭菌压力和需要维持的时间不同。
⑥达到灭菌时间时，将锅离开热源，让其自然冷却，待压力降为零时，打开气阀。
⑦打开锅盖，借余热烘干试管口棉塞。
⑧取出试管，趁热摆成斜面，斜面的长度为试管长度的1/2，摆斜面时一定要小心，不要倾斜过度使营养液沾到管口的棉塞。斜面冷却凝固后，培养基制备完成。
马铃薯葡萄糖琼脂培养基适合于大多数食用菌种类，应用广泛。
2.综合马铃薯培养基 该培养基多用于母种的保存。
配方。马铃薯200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁1.5克，维生素B110毫克，琼脂18克，水1000毫升，pH值6.5。
调制、灭菌的方法同马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
3.无琼脂母种培养基 前述培养基制作都需要琼脂做凝固剂，且琼脂价格较贵，若无琼脂，也可用下面的方法制作母种培养基。
（1）米饭培养基。米饭150克，葡萄糖15克，pH值5.5～7.0，在制作时首先将米粒煮至熟而不烂，然后拌入葡萄糖，搅拌均匀，最后用小木片分装于试管内，用量适宜，并压制成斜面，及时用棉塞封口并灭菌。
（2）玉米粒培养基。玉米粒100克，氯化钠1克，磷酸二氢钾2克，葡萄糖10克。
首先将玉米粒粉碎成黄米粒大小，取1000毫升水加热至水开时，加入玉米粒、氯化钠、磷酸二氢钾，煮到玉米粒熟而不烂时，用纱布过滤，取渣，再拌入葡萄糖，然后分装于试管内压成斜面，用棉塞封口，及时灭菌。
（3）胡萝卜培养基。选择粗细与试管接近的胡萝卜，洗净，顺长切成两半，再切成试管长度的1/2长，分装于试管内，封口并及时灭菌。
（4）马铃薯培养基。将马铃薯煮熟，去皮后捣成泥状，用小木片分装于试管内，并压成斜面，用棉塞封口并及时灭菌。
（二）原种培养基的制作
1.麦粒培养基 麦粒培养基适合于大多数食用菌的原种培养。
（1）配方。麦粒97.5%，碳酸钙1.5%，石膏粉1%。
（2）调制。将麦粒用1%的石灰水浸泡24小时后捞出，用清水清洗后加水煮至熟而不烂，麦粒千万不能破肚露白，捞出后晾干麦粒表面的水分，再拌入碳酸钙粉，必须拌匀，然后装瓶或装袋，封口后及时灭菌，菌种袋可用绳子扎口，菌种瓶可用棉塞封口。菌种袋的规格常以17厘米×34厘米为宜，菌种瓶常用500毫升的专用菌种瓶或医用葡萄糖瓶。
（3）灭菌。菌种袋培养基需在1.2～1.3千克/平方厘米压力下维持2.5小时，压力不能太大，否则造成菌袋粘连或者冲袋，前功尽弃。菌种瓶可在1.5千克/平方厘米压力下维持2小时即可。
2.粪草培养基 粪草培养基适合于双孢菇原种的培养。
可采用双孢菇发酵料的配方及发酵方法，但较栽培料的发酵生一些，排尽料内的废气及异味后，装瓶灭菌。也可将发酵料晒干后备用。
（三）栽培种培养基的制作
原种培养基可用于栽培种培养基，但由于原种培养基的原料精细，价格高，栽培种用量又大，因此从成本考虑，栽培种培养基配方中的主料一般占80%，辅料（精料）一般占20%，装瓶、装袋及灭菌操作同原种培养基。
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