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压舱水的灭菌方法

时间:2022-10-04 百科知识 版权反馈
【摘要】:经高压灭菌20min后室温保存。4.0.1mol/L Ca Cl2溶液:取1.1g Ca Cl2溶于100m L dd H2O,经高压灭菌后4℃保存。6.DEPC处理水:1000m Ldd H2O中加入0.1m L DEPC,于37℃过夜后高压灭菌,保存于4℃。8.液体LB培养基:称量5g胰蛋白胨,2.5g酵母浸出物,2.5gNa Cl,加dd H2O定容至500m L,高压灭菌20min后保存于4℃。10.ACD抗凝剂:称取7.35g葡萄糖,2.4g柠檬酸,6.6g柠檬酸钠,加水定容至500m L,高压灭菌。

1.50×TAE缓冲液:称量242 g Tris,37.2 g Na2EDTA·2H2O于1 L烧杯中,加入约800 m L去离子水,充分搅拌均匀后加入57.1m L的冰乙酸,充分溶解后加去离子水定容至1 L,室温保存。

2.PBS:称量8 g Na Cl、0.2 g KCl、1.44 g Na2HPO4和0.24 g KH2PO4后于800 m L蒸馏水中溶解,调p H至7.4,加水定容至1000 m L。经高压灭菌20 min后室温保存。

3.1%琼脂糖凝胶:称量0.25 g琼脂糖经加热溶于25 m L1×TAE缓冲液。

4.0.1 mol/L Ca Cl2溶液:取1.1 g Ca Cl2溶于100 m L dd H2O,经高压灭菌后4 ℃保存。

5.60%甘油:取6 m L甘油加入dd H2O至10 m L。

6.DEPC处理水:1000 m L dd H2O中加入0.1 m L DEPC,于37 ℃过夜后高压灭菌,保存于4 ℃。

7.Amp水溶液:取l g氨卞青霉素钠溶于20 m L灭菌过的dd H2O中,配成50 mg/m L的Amp水溶液,分装于1.5 m L离心管,于-20 ℃保存。

8.液体LB培养基:称量5 g胰蛋白胨,2.5 g酵母浸出物,2.5 g Na Cl,加dd H2O定容至500 m L,高压灭菌20 min后保存于4 ℃。

9.含Amp的LB固体培养基:每100 m L液体LB培养基中加入1.5 g琼脂粉,经120 ℃高压灭菌,待液体冷却至45 ℃左右时加入0.2 m L50 mg/m L的Amp,混匀后倒入灭菌过的培养皿中,用蜡条密封,经15 min紫外灯照射后保存于4 ℃。

10.ACD抗凝剂:称取7.35g葡萄糖,2.4g柠檬酸,6.6g柠檬酸钠,加水定容至500m L,高压灭菌。每6m L新鲜血液加入1m LACD抗凝剂。

11.Ca Cl2溶液(0.05mol/L):称取0.28g Ca Cl2(无水,分析纯),加入50m L双蒸水中,充分混匀后定容至100m L,121℃,20分钟,4℃冰箱内保存。

含15%甘油的0.05mol/L Ca Cl2溶液:称取Ca Cl2(无水,分析纯)0.56g,溶于150m L双蒸水中,加入30m L甘油,加水定容至200m L,121℃,20分钟,4℃冰箱内保存。

12.Na Ac(3mol/Lp H5.2):称40.81g Na Ac·3H2O溶于50m L双蒸水中,利用冰醋酸将溶液p H值调整至5.2,加双蒸水定容至100m L,121℃,20分钟,分装成每管1m L,置于4℃冰箱。

13.Tris-HCl(1M p H=8.0):称取121.1g Tris碱,溶于700m L蒸馏水中,加入浓HCl调p H值至8.0,加水定容至1L,121℃,20分钟,高压灭菌。

14.EDTA(0.5M p H=0.8):称取93.05g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na· 2H2O),加入400m L蒸馏水,磁力搅拌器搅拌溶解,利用5mol/L Na OH将p H调整至8.0,然后加水定容至500m L,121℃,20分钟,高压灭菌。

15.30%丙烯酰胺:利用70m L37℃的双蒸水溶解29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺,加双蒸水定容至100m L,利用灭菌滤纸过滤去除杂质,将滤液导入棕色瓶中,4℃保存。

16.SSCP上样缓冲液:98%去离子甲酰胺、10m mol/L的EDTA(p H8.0)、0.025%溴酚兰、0.025%二甲苯菁FF、10%的甘油。

17.5×TBE:54g Tris碱、27.5g硼酸、20m L EDTA(0.5Mp H=8.0),溶解后加水定容至1L。

18.10%过硫酸胺:1g过硫酸胺加入8m L双蒸水中,转移到容量瓶中,用双蒸水定容至10m L。

19.1%硝酸银染色液:利用500m L双蒸水溶解0.5g硝酸银,溶液用棕色瓶室温保存。

20.银染显色液(2%碳酸钠溶液):10g碳酸钠溶于500m L双蒸水中,临用前每500m L加1m L37%的甲醛溶液。

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