【摘要】：任务5 柠檬酸发酵一、相关知识黑曲霉的适宜生长温度为35℃，适宜产酸温度是26～28℃。因此，菌盖形成之后，在菌盖下面有一个低pH区域，菌体合成柠檬酸的活动在这低pH区域内进行，所以不应该搅动发酵液，避免低值区域的pH上升长菌而不产酸。3．发酵接种后，去掉锥形瓶上的牛皮纸，摊开通气塞，用绳子把纱布扎好。
柠檬酸发酵_微生物实验实训
任务5 柠檬酸发酵
一、相关知识
黑曲霉的适宜生长温度为35℃，适宜产酸温度是26～28℃。若温度太高，容易形成杂酸等副产物且菌体易衰老；若温度太低，发酵周期被延长。
黑曲霉长菌的最适pH为中性，而产酸的最适pH在2．0～2．5。因此，菌盖形成之后，在菌盖下面有一个低pH区域，菌体合成柠檬酸的活动在这低pH区域内进行，所以不应该搅动发酵液，避免低值区域的pH上升长菌而不产酸。
二、实训器材
微生物实验室常用器材，扩大培养的实验室种子，玉米发酵糖液。
三、实训步骤
1．玉米粉发酵糖液灭菌
分装发酵糖液于250mL锥形瓶中，每瓶装不多于1／2的体积。用8层纱布做成通气塞，外面用牛皮纸包扎好，高压蒸汽灭菌。
2．接种
将培养好的实验室种子液按无菌玉米粉水解糖液体积的10%接入无菌水解糖液中。
3．发酵
接种后，去掉锥形瓶上的牛皮纸，摊开通气塞，用绳子把纱布扎好。将锥形瓶放入恒温振荡培养箱中，培养温度维持在35℃，湿度75%。约20h可出现灰白色、很薄的菌膜。维持72h左右，以促进孢子发芽及菌体发育，菌膜完全形成，相当厚且有皱褶。自接种后72h起进入产酸期，这时菌体代谢速率高，耗糖快，发酵液酸度急剧升高，并释放出大量热，此时调节温度在26～28℃，湿度仍在75%以上，以利于柠檬酸的形成。
四、思考题
（1）简述柠檬酸的生产过程。
（2）摇瓶的瓶塞与培养基的瓶塞、菌种管的管塞为何不同？
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