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表型迟缓和选择程序

时间:2022-09-29 百科知识 版权反馈
【摘要】:体细胞诱变实验的关键是给突变型细胞一段表达突变表型的表达期。细胞发生突变后,并不会立刻表现出突变型的表型,而是要间隔一段时间,这种现象称为表型迟缓。只有这两个过程完成之后,即度过了一定的表达期之后,方能用选择剂来选择实验细胞群体中的突变型细胞。图6-4是体细胞诱变实验的一个基本参考模式,在具体工作中可根据细胞和标志基因的性质做些改动。

体细胞诱变实验的关键是给突变型细胞一段表达突变表型的表达期。细胞发生突变后,并不会立刻表现出突变型的表型,而是要间隔一段时间,这种现象称为表型迟缓。在表达期中,细胞经历了两个性质不同的过程:一是诱变剂引起的损伤和结构变异在复制后的DNA分子中得以固定,这个过程和DNA的复制、易误修复(error-prone repair)、重组错位(unequal exchange)、单链断裂,以及DNA小段缺失等细胞反应有关;二是某种为选择剂所作用的标志基因在发生突变前编码合成的正常蛋白产物,及其翻译模板mRNA的数量下降到某种水平,或者是细胞内标志基因的突变型蛋白产物,积累到足以使细胞表现其突变表型。这两个过程都需要一定的时间,然后才能使突变细胞在细胞水平显示该基因突变的作用。只有这两个过程完成之后,即度过了一定的表达期之后,方能用选择剂来选择实验细胞群体中的突变型细胞。图6-4是体细胞诱变实验的一个基本参考模式,在具体工作中可根据细胞和标志基因的性质做些改动。

图6-4 诱变实验操作程序流程示意

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