免疫组织化学染色

免疫组织化学染色是应用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究。与免疫荧光相比设备简单、结构清晰、易于保存。

（一）具体步骤

1.石蜡切片常规脱蜡入水。

2.入3%的H2O24℃孵育10min，消除内源性过氧化物酶的活性。

3.入PBS洗，加0.05%胰酶37℃20min或采用微波抗原修复。

4.入PBS洗，血清室温封闭，10～20min。

5.加一抗室温或4℃过夜。

6.入PBS洗，加生物素标记的二抗工作液室温20～40min。

7.入PBS洗，加辣根酶标记链酶卵白素工作液室温20～40min。

8.入PBS洗，显色剂DAB发色5～10min。

9.自来水洗，复染，梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片（图3-13）。

图3-13　肾小管上皮细胞胞浆内TGF-β1阳性表达（×200）

参考文献

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