【摘要】：发射光谱分析技术是根据物质受热能或电能等激发后所发射出的特征光谱线进行定性及定量分析的一种方法。发射光谱分析主要有火焰光度法、荧光光度法等。火焰光度法具有操作简单、灵敏度高、干扰因素少等特点,可用于碱金属与碱土金属元素的分析,在生物化学检验中,主要用于血清钠和钾测定。许多物质的分子吸收电磁辐射后,能发出特有的荧光,利用荧光波长或强度对物质进行定性和定量分析的方法,称为荧光光度法。
发射光谱分析技术_生物化学检验技术
发射光谱分析技术是根据物质受热能或电能等激发后所发射出的特征光谱线进行定性及定量分析的一种方法。发射光谱分析主要有火焰光度法、荧光光度法等。
(一)火焰光度法
火焰光度法是利用火焰作为激发光源对待测物质进行原子分析的一种分析方法。它的基本原理是利用火焰对某些元素进行激发,受激发的元素,其外层电子由于获得能量而跃迁到高能阶,接着它们又以发射光谱的形式释放出所获得的能量返回基态。在相同条件下,同一元素所放出的单位能量相同,故能形成固定光谱;不同的元素激发后所发射的光谱各不相同。如钾的特征光谱线波长为767nm(暗红色),钠的特征光谱线波长在589nm(黄色)。在一定范围内,发射的光谱线强度与待测元素的浓度成正比,故可对待测元素进行定量分析。
火焰光度法具有操作简单、灵敏度高、干扰因素少等特点,可用于碱金属与碱土金属元素的分析,在生物化学检验中,主要用于血清钠和钾测定。
(二)荧光光度法
荧光光度法是一种分子发光分析方法。许多物质的分子吸收电磁辐射后,能发出特有的荧光,利用荧光波长或强度对物质进行定性和定量分析的方法,称为荧光光度法。
荧光光度法的基本原理:物质中的分子吸收光能由基态跃迁至激发态,当从激发态返回基态时,能发出比原激发光频率较低的荧光。激发光一般为紫外光,发出的荧光多为可见光。对于一种浓度较小的荧光物质,在一定范围内,其荧光强度与溶液浓度呈线性关系,据此可测定荧光物质的含量。
荧光光度法由于灵敏度高、特异性强、操作简便快速、样品用量少等优点,在医学检验和医学科研中应用较广,如激素及其代谢产物、胺类、维生素及部分药物浓度的测定等。
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