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设计酶化学修饰的注意点

时间:2022-02-10 百科知识 版权反馈
【摘要】:以下几点是设计酶化学修饰反应时必须注意的。在选择修饰剂时应考虑:①修饰剂的相对分子质量、修饰剂链的长度、对蛋白质的吸附性;②修饰剂上反应基团的数目及位置;③修饰剂上反应基团的活化方法与条件。一般条件下,要求修饰剂具有较大的相对分子质量、良好的生物相容性和水溶性,修饰剂分子表面有较多的反应基团及修饰后酶活的半衰期延长。反应的最终结果是要得到酶和修饰剂的高结合率及高酶活回收率。
设计酶化学修饰的注意点_超氧化物歧化酶

6.1 设计酶化学修饰的注意点

酶化学修饰所用的各种方法、手段虽多,但基本原则都是充分利用修饰剂所具有的各类化学基团的特性,或直接或经过一定的活化过程与酶分子上某种氨基酸残基(一般尽量选择非必需基团)产生化学反应,对酶分子结构进行改造。以下几点是设计酶化学修饰反应时必须注意的。

(1)对酶性质的了解。主要包括对酶的活性部位、酶的稳定条件、酶反应最佳条件及酶侧链基团性质的了解。

(2)对修饰剂的要求。在选择修饰剂时应考虑:①修饰剂的相对分子质量、修饰剂链的长度、对蛋白质的吸附性;②修饰剂上反应基团的数目及位置;③修饰剂上反应基团的活化方法与条件。一般条件下,要求修饰剂具有较大的相对分子质量、良好的生物相容性和水溶性,修饰剂分子表面有较多的反应基团及修饰后酶活的半衰期延长。

(3)对酶反应条件的选择。修饰反应一般总是尽可能在酶稳定条件下进行,尽可能少破坏酶活性功能的必需基团。反应的最终结果是要得到酶和修饰剂的高结合率及高酶活回收率。因此选择反应条件时要注意:①反应体系中酶与修饰剂的分子比例;②反应体系的溶解性质,盐浓度和pH条件;③反应温度及时间。以上的反应条件随修饰反应的类型不同而不同,需要经过大量实验才能确定。

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