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二十一同源重组图示连接分析

时间:2022-02-09 百科知识 版权反馈
【摘要】:并对这三个步骤作简要说明。但较低浓度的RuvA蛋白和RuvB蛋白却能共同与Holliday连接体结合。
同源重组_分子生物学练习

二十一、同源重组

1.图示Holliday连接,分别显示下列过程:

a.支链迁移

b.产生一个小的异源双链DNA

c.产生十字交叉的重组DNA

2.RecA参与的同源重组包括哪三个步骤?并对这三个步骤作简要说明。

3.有什么证据表明RecA蛋白将单链DNA包裹?在RecA蛋白与单链DNA的相互作用中SSB起着什么样的作用?

4.如何用实验证明RecA蛋白在重组开始阶段的联会过程中是必需的。

5.如何证明在电子显微镜中观察到的联会现象是真正的联会,而不是碱基配对?

6.如何用实验证明在体外条件下DNA链的交换需要RecA蛋白的参与?

7.如何用实验证明RecBCD蛋白能在DNA链的χ位点附近产生一个缺口?如何证明这个缺口是由RecBCD蛋白产生的,而不是由于其他原因如污染产生的?

8.如何用实验证明RecBCD蛋白具有DNA解旋酶活性?

9.用凝胶阻滞实验来证明:RuvA蛋白在高浓度条件下能与Holliday连接体结合,而RuvB蛋白则不能。但较低浓度的RuvA蛋白和RuvB蛋白却能共同与Holliday连接体结合。在这一实验中,戊二醛的功能是什么?

10.用DNase足迹法证明:RuvA蛋白结合在Holliday连接体的中心,而RuvB蛋白结合在支链迁移点的上游位置?

11.如何用实验证明支链迁移发生的方向与RuvAB-Holliday连接体复合物中RuvB蛋白的位置是相反的。

12.画出RuvAB-Holliday连接体复合物的示意图,其中Holliday连接体已经形成了交叉结构,准备开始支链迁移,示意图中要包括RuvB环,不包括RuvA四聚物。

13.如何用实验证明RuvC蛋白能解离Holliday连接体。

14.有哪些实验证据说明RuvA、RuvB和RuvC蛋白都存在于与Holliday连接体形成的复合物中的?

15.简述酵母的减数分裂重组模型。

16.用实验证明:在酵母的减数分裂重组过程中有DSB形成。

17.用实验证明:在酵母的减数分裂重组过程中Spo11与DSB是共价连接的。

18.简述减数分裂中的基因转换模型。

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