鲜牛奶的消毒实验

实训20　鲜牛奶的消毒实验

一、实训目的

（1）了解鲜牛奶中微生物的生长情况。

（2）学习并掌握巴氏消毒法。

（3）了解细菌的分离和活菌计数方法。

二、实训原理

牛奶是微生物活动的天堂，因此容易腐败，在适宜的培养基与温度条件下培养，易观察并记录下一定稀释度的牛奶中的杂菌情况。普通的加热煮沸，虽然能杀菌，但会破坏牛奶的营养成分。巴氏消毒法，即将牛奶加热至62～65℃，维持30min；或加热至73．8～76．6℃，持续1～10min，然后迅速冷却。巴氏消毒法为一种温和的杀菌方法，既可杀死对健康有害的病原菌又可使乳质尽量少发生变化。为检验杀菌效果，将一定稀释度的牛奶在LB培养基中于大多微生物适宜生长繁殖的温度（37℃）下培养，24～48h后观察杂菌情况。通过检测，可了解消毒前后牛奶中微生物不同的生长情况。

三、实训器材

1．样品

鲜牛奶1瓶。

2．培养基

LB培养基1瓶。

3．器皿

无菌培养皿4个，无菌空试管8支，1mL无菌吸管8支，5mL无菌吸管2支。

4．其他

恒温水浴锅，无菌水1瓶。

四、实训步骤

1．鲜牛奶的杂菌计数

（1）摇匀奶样，用无菌水稀释成10^－1、10^－2、10^－3、10^－4的稀释度。

（2）吸取10^－3、10^－4稀释度的奶样各1mL于2个无菌培养皿内，迅速将熔化并冷却至45℃的LB培养基注入皿内，摇匀待凝。

（3）37℃培养24～48h后计数。

2．消毒后牛奶的杂菌计数

（1）取5mL鲜牛奶于试管内，置于63℃水浴中保温30min，取出后立即放入冷水中冷却。

（2）取出样品稀释成10－1、10－2的稀释度。

（3）吸取10^－1、10^－2稀释度的奶样各1mL于2个无菌培养皿内，然后注入熔化并冷却至45℃的LB培养基，迅速摇匀待凝。

（4）37℃培养24～48h后计数。

3．注意事项

（1）巴氏消毒时，一定要等试管内鲜牛奶的温度到达63℃时才开始计时（30min）。

（2）消毒过程中，要不时摇动一下试管，使温度均匀。

五、结果记录

将实验结果填入表3－10中。

表3－10　鲜牛奶消毒实验结果

六、思考题

（1）什么是巴氏消毒法？

（2）巴氏消毒法有何意义？