十二、产气荚膜梭菌
产气荚膜梭菌（clostridium perfringens）为厌氧革兰阳性粗大芽胞杆菌。本菌明显的特征是在含铁牛乳中经30±1℃培养24小时，能产生“暴力发酵”现象。该菌形成芽胞在体外抵抗力极强，能在110℃存活1～4小时，能分泌强烈的外毒素，按毒素的性质可分6型（A，B，C，D，E，F），引起食源性疾病的主要是A型和F型，其中以A型（能产生肠毒素）为多，C及F型偶可引起出血坏死性肠炎。本菌在自然界分布较广，污水、垃圾、土壤、人和动物的粪便、昆虫以及食品等均可检出。致病食物由于存放较久或加热不足，细菌大量繁殖，产生毒素引起食源性疾病。
1．常规分离鉴定技术
（1）检验样品处理：剩余食品、可疑食物，按GB／4789．13-2003的方法，患者粪便不需作任何处理，但是必须立即接种培养。
（2）菌量测定：将检验样品的1∶10悬液用0．1％蛋白胨水进行10倍递增稀释，取适当稀释度的稀释液，于SPS琼脂培养计数可疑菌落，从中挑取10个菌落按GB／4789．13-2003的方法进行证实试验。
（3）增菌及分离培养：按GB／T 4789．13-2003的方法进行。
（4）肠毒素测定
1）粪便中肠毒素测定：粪便中加入生理盐水，做成10％的乳剂，经离心后取上清液置于微量凹孔板中，做成三排2倍递增的稀释液，进行反向被动血细胞凝集试验。
2）菌株产肠毒素试验：该菌在芽胞形成的初期菌体中含有肠毒素，当芽胞成熟、菌体崩解时肠毒素游离出来。故将耐热菌株接种于DS促芽胞培养基，不耐热菌株接种于Tortora培养基，经36±1℃培养24～48小时后离心，取上清液作检样，按粪便中肠毒素测定方法进行测定。也可将未形成芽胞的本菌繁殖体大量注入家兔结扎的回肠段内观察是否出现产肠毒素的现象。
2．流行病学调查分型技术
（1）血清学分型：使用Hobbs分型血清（1～17型或1～24型）和TW分型血清（1～59型）与不同来源的菌株作玻片凝集试验，根据凝集状况判断被检菌的血清型。如发生自凝，可将其接种于1％葡萄糖肉汤，经36±1℃培养18小时后，用其离心洗涤过的菌体作玻片凝集试验。
（2）双份清抗体滴度测定：分离获得的菌株制成菌体抗原，分别与患者发病初期与恢复期的血清做试管定量凝集试验，以观察患者血清中有否相应抗体存在和抗体滴度的升高。
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