蛙肠系膜微循环的观察

实验八　蛙肠系膜微循环的观察

一、实验目的

1.学习并掌握观察微循环的基本实验方法。

2.观察肠系膜各类血管内的血流情况并了解其特点。

3.了解某些因素对血管舒缩活动的影响。

二、实验原理

微循环是指微动脉和微静脉之间的血液循环，它是实现血液和组织液之间进行物质交换的场所。微循环一般包括微动脉、后微动脉、毛细血管前括约肌、通血毛细血管、真毛细血管网、动－静吻合支和微静脉等部分。

蛙类的肠系膜很薄，易于透光，在显微镜下可以直接观察到其微循环血流状态、微血管的舒缩活动及不同因素对微循环的影响。小动脉、微动脉管壁厚，管腔内径小，血流速度快，血流方向是从主干流向分支，有轴流现象；小静脉、微静脉管壁薄，管腔内径大，血流速度慢，无轴流现象，血流方向是从分支向主干汇合；而毛细血管管径最细，仅允许单个细胞依次通过。

三、实验对象

蛙类。

四、实验器材

蛙类手术器械1套、注射器、显微镜、吸管、有孔蛙板等。

五、实验药品

任氏液、1∶10 000去甲肾上腺素、1∶10 000乙酰胆碱、20%氨基甲酸乙酯溶液等。

六、实验步骤和观察项目

1.动物准备

（1）麻醉、固定 取蛙1只，称重，以20%氨基甲酸乙酯在尾骨两侧进行皮下淋巴囊注射，剂量：3mg/g体重，约10～15min进入麻醉状态。用大头针将蛙腹位（或背位）固定在蛙板上。

（2）手术 在腹部的旁侧剪一长形切口，轻轻拉出一段小肠袢，用大头针数枚将肠系膜展开并小心固定在有孔的蛙板上，手术过程中要避免出血，不断滴加任氏液防止肠系膜干燥（图4－8－1）。

2.观察项目

（1）低倍显微镜下微循环的观察 识别动脉、小动脉、静脉、毛细血管和小静脉（图4－8－2），观察血管壁、血细胞形态、血流方向、血管口径和流速等有何特征。

（2）高倍镜下的毛细血管观察 可以观察到毛细血管管壁极薄，管径较细，血流速度较慢。毛细血管数目繁多且相互交织成网状。因毛细血管具有开放和关闭的功能，所以高倍镜下某些血管时而消失，时而出现。

图4－8－1　蛙肠系膜标本固定方法

图4－8－2　肠系膜小血管镜下观

（3）观察去甲肾上腺素对微循环血管舒缩活动的影响 用一小片滤纸小心吸干肠系膜上的任氏液，然后在肠系膜上滴加1滴1∶10 000去甲肾上腺素，观察血流和血管口径的变化。

（4）乙酰胆碱对微循环血管舒缩活动的影响 待血流恢复正常，在肠系膜上滴加1滴1∶10 000乙酰胆碱，观察血管口径及血流的变化。

七、注意事项

1.手术操作过程要仔细，避免出血影响视野。

2.为防止标本干燥，在实验过程中要不断滴加任氏液。

八、思考题

1.小动脉、小静脉和毛细血管中血流各有什么特点？动脉中的血流为什么有轴流、壁流之分？

2.当在肠系膜上滴加1滴乙酰胆碱或去甲肾上腺素后，微循环中哪些血管口径会发生变化，为什么？