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细胞块制片

时间:2022-04-20 理论教育 版权反馈
【摘要】:细胞块标本与细胞学标本有相同外形的索链样细胞团,在细胞学中可能是不完整的局部条索状或链状胸腔积液标本的离心涂片、石蜡包埋切片及细胞块ICC染色的图像胸腔积液标本的液基细胞学涂片,腺癌细胞成小的三维立体团,胞质中含大的分叶状黏液空泡;与同一次标本所制的细胞块所见相同。液基制片;组织切片阴性胸腔积液标本中的细胞碎片,显示小体积的间皮细胞呈片状团,无论细胞块或离心直接涂片标本均显示良性形态的间皮细胞。

在离心沉淀的基础上,经过丙酮或甲醛固定液的固定处理,形成细胞块(cell block),将沉淀物细胞做成石蜡包埋切片,用组织学方法观察细胞学形态内容,这种方法是近年来被推崇的技术之一(图1-12~图1-15),尤其重要的是用这种切片进行免疫细胞化学染色,其效果是优良的。但这种方法有一定局限性:在肿瘤细胞量极少的情况下,不易被检出;诊断者需要有细胞学诊断的判读经验;切片技术耗时长,出报告时间延长;需切片机等专用设备等。细胞学标本还可以直接用扫描电镜观察或制作透射电镜细胞切片观察,对诊断是很有用处的辅助手段(图1-16)。细胞块制作的步骤如下。

1.标本预处理。胸腔积液、腹水标本立即处理,先沉淀离心处理,若血液过多,洗涤后先采用液基制片或用Cytospin制细胞片,细胞片作为对比与细胞块同样重要。剩余标本用丙酮固定。

2.预留的胸腔积液/腹水离心后经丙酮固定后的标本经上、下摇动后置两个50ml离心管平衡后离心,5min,1000r/min。

3.沉淀红细胞洗涤后离心,直至血液成分减少或离心管内的红色物质逐渐淡化变为白色物质。

4.将沉淀收集于小试管中加入10%乙醛液中固定3h,上机脱水和透明处理后第2天直接包埋、切片、脱蜡、透明以及乙醇下行加水水洗,常规染色或免疫组织化学染色(IHC)。

图1-12 细胞块与细胞学标本比较

细胞块标本(A,HE×200)与细胞学标本(B,Pap×200)有相同外形的索链样细胞团,在细胞学中可能是不完整的局部条索状或链状

图1-13 涂片、细胞块和ICC标记

胸腔积液标本的离心涂片(A,Pap×400)、石蜡包埋切片(B,HE×400)及细胞块ICC(C,CEA×400)染色的图像

图1-14 液基细胞涂片与细胞块的腺癌细胞

胸腔积液标本的液基细胞学涂片(A),腺癌细胞成小的三维立体团,胞质中含大的分叶状黏液空泡;与同一次标本所制的细胞块所见相同(B)。液基制片(Pap×400);组织切片(HE×400)

图1-15 胸腔积液中的间皮细胞的细胞块与涂片比较

阴性胸腔积液标本中的细胞碎片,显示小体积的间皮细胞呈片状团,无论细胞块或离心直接涂片标本均显示良性形态的间皮细胞。细胞块切片(HE×400);直接涂片(HE×400)

图1-16 胰腺癌的腹水半薄切片、电镜与细胞学所见

胰腺的腺泡细胞癌表现为胞质内含黏液空泡的腺泡细胞与胞质内无黏液空泡、均一深染胞质的立方样(润管细胞)或高柱状癌细胞(纹状管细胞)混合呈小管和腺泡形态(C)。电镜半薄切片(A)(亚甲蓝染色×1000);电镜切片(B)(铅铀双染×3000);腹水涂片(C),Pap×200

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