抗中性粒细胞胞质抗体

抗中性粒细胞胞质抗体（anti-neutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）是一组对中性粒细胞许多胞质抗原所产生的自身抗体，其靶抗原实际为中性粒细胞胞质中的颗粒蛋白酶。如蛋白酶3、髓过氧化物酶、人白细胞弹性蛋白酶、乳铁蛋白，组蛋白G、溶酶体酶等。ANCA可出现两种核型，即胞质型（Cytoplasmic ANCA，c-ANCA）和核周型（Perinulear ANCA，p-ANCA）和不典型（xANCA）。ANCA对系统性血管炎、炎症性肠病等的诊断与鉴别诊断具有重要意义。

【测定方法】

间接免疫荧光法（IIF）

原理：稀释后的待检血清滴加在人粒细胞抗原基质上，如被检血清中存在抗中性粒细胞胞质抗体，则与基质片中的中性粒细胞胞质抗原结合，形成抗原抗体复合物（主要是IgG类），再与加入的羊抗人IgG荧光抗体结合，在荧光显微镜下可观察到中性粒细胞胞质位置有亮绿色荧光，则为抗中性粒细胞胞质抗体（anti-neutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）阳性。

【参考范围】

阴性（抗体滴度＜1∶10）

结果判断：当被检血清中存在抗中性粒细胞胞质抗体时，在荧光显微镜下可观察到中性粒细胞胞质呈现亮绿色荧光染色，为ANCA阳性。

【临床应用价值】

1．ANCA可出现两种核型。①胞质型（Cytoplasmic ANCA， c-ANCA）：c-ANCA主要与丝氨酸蛋白酶类反应，其自身抗原是蛋白酶3，故又称抗蛋白酶3抗体或PR3抗体。阳性时，人中性粒细胞胞质内有荧光颗粒，细胞核阴性。主要与韦格肉芽肿（Wegener’s granulomatosis，WG）血管炎有关，其滴度与病情活动一致。②核周型（Perinulear ANCA，p-ANCA）又称抗髓过氧化物酶抗体，其靶抗原是髓过氧化物酶、乳铁蛋白、溶菌酶等。阳性时人中性粒细胞、H2-60白血病细胞株核周出现荧光着染，细胞核阴性。可在Churg-Strass综合征、多种系统性血管炎及溃疡性结肠炎的病人中产生。

2．ANCA对于血管炎疾病的鉴别诊断及预后估计均有价值，而且是疾病活动的一个重要指标。在病人发病（复发）时，ANCA滴度均升高。有研究表明，c-ANCA在血管炎复发前2～5周可升高4倍。所以，c-ANCA可作为预测病情复发的指标。c-ANCA滴度可鉴别复发与其他原因（如感染）造成的病情恶化。

【影响因素】

1．应用IIF法检测ANCA应特别注意排除抗核抗体对实验的干扰。常出现p-ANCA假阳性，必要时进行抗核抗体检测。IIF法检测ANCA时可因特异性靶抗原性质不同及检测底物粒细胞抗原片固定方法的差异而表现不一。IFF法检测，温育时应注意避免光线直射载玻片。

2．严重脂血或溶血标本，应重新留取合格标本，再做检测。已稀释标本必须当天检测。

（陈　静）