双层组织工程皮肤的应用及性能评价

一、Apligaf的应用

Apligaf不能用于临床污染创面、已知对牛胶原过敏的患者及已知对运输培养基成分过敏者。临床使用时必须遵循一定的操作规程，发现异常情况应及时处置。操作规程参见第一篇的相关内容。

（一）治疗慢性顽固性溃疡

在273例病程大于2年的静脉性溃疡患者的平行分组、多中心、随机、对照试验中，与传统的加压疗法比较，应用Apligraf创面愈合更快、更经济，并且没有排斥反应和过敏反应的临床和实验室证据。

在糖尿病溃疡多中心随机对照试验中，溃疡外科清创至活组织后，Apligaf比传统治疗组愈合率更高，完全愈合时间更短。

Apligraf对修复一些外科手术后的并发溃疡同样是非常有效的。Allie等观察了1998－2001年用隐静脉做冠状动脉搭桥术发生腿部（30／45例）或胸骨部（9／15例）并发症的患者，用Apligraf做主要治疗，对照传统清创、换药治疗。发现用Apligraf治疗更简便，时间和资源耗费更少。

另外，还有用Apligraf成功治疗坏疽性脓皮病的报道。

（二）修复皮肤切除术创面

在15例皮肤癌切除术后的修复试验中，Apligraf移植后有12例（80%）成功修复创面，愈合效果好于自体皮移植。在治疗供皮区皮肤缺损的平行对照试验中发现，Apligraf无论在愈合时间、减轻疼痛和美容效果上均优于聚氨酯薄膜。修复肥厚性瘢痕切除后的皮肤缺损也有成功的报道。

（三）治疗烧伤

Hayes用Apligraf成功修复了1例左足背三度烧伤创面，获得了满意效果。在一个多中心、随机、控制研究中，将Apligraf覆盖到网状刃厚（split thickness）自体皮移植后的创面，与覆盖异体皮或不覆盖生物敷料的传统治疗方法比较，可获得更好的美容和功能效果。

（四）治疗大疱性皮肤病

Apligraf治疗大疱性表皮松解症有许多报道。在早期的临床研究中，19名患者接受了Apligraf治疗。结果说明，与传统的包扎相比，Apligraf更能改善治疗与延缓再次发生水疱的时间间隔。Apligraf治疗大疱性表皮松解症，愈合快、外观好，对肢端的皮肤缺损还能起到恢复功能缺陷的作用。另外，还有成功治疗大疱性硬斑病的报道。

（五）透皮吸收研究模型

Apligraf还被用作体外药物透皮吸收的研究模型，评估刺激性物质对人皮肤的累积刺激潜能。Medina J等研究了Apligraf在体外应用凡士林、维生素D3、反式维A酸和十二烷基硫酸钠时的反应，认为Apligraf可以敏锐而特异地通过监测细胞毒性、前炎性因子和形态改变来反应这些药物的皮肤累积刺激潜能。但Schmook等认为其价值不如猪皮。

二、其他双层活皮肤替代物的应用

OrCel有临床修复严重烧伤、手指屈肌挛缩、并指松解术和隐性大疱性表皮松解症皮损的报道。

同种异体细胞和来自于鼠尾的酸溶胶原构建的胶原凝胶双层皮肤结构被用在3例文身切除后的皮肤创面上，获得的美容效果很好且收缩很少，组织学显示移植区域存在没有附件的完全分化且成熟的表皮，这种鼠尾胶原凝胶人工皮肤还被成功用于治疗烧伤。

复合培养皮肤（CCS）是由种植有Fb的多孔牛胶原海绵和一层表皮角质细胞组成。CCS的角质细胞在培养过程中没有在空气中暴露，所以与人皮相比，没有发育为完全分化的表皮与角质层。CCS在烧伤、慢性创伤、皮肤大疱性疾病的临床使用中正在测试。Eisenberg和Lewelyn报道在治疗大疱性表皮松解症中使用CCS已取得成功。

用壳多糖做交联剂的有细胞胶原海绵人工皮肤也有成功用于治疗烧伤等皮肤创面的报道。

三、双层组织工程皮肤的性能评价

胶原凝胶类双层皮肤替代物的优点有：①细胞凝胶的组织学表现接近正常真皮；②不必加入可能释放毒性物质的合成聚合体和交联剂；③生产胶原凝胶皮肤替代物的必需细胞数量相对较少；④市售产品达到一次外科手术同时重建真皮和表皮。其主要缺点有：①胶原凝胶会收缩80%左右（但可通过锚定凝胶避免表面积收缩而仅厚度变薄）；②胶原凝胶抵抗胶原酶降解能力差；③使用同种异体细胞和牛胶原，易遭到病毒感染和免疫排斥反应；④脆性大，操作困难；⑤胶原凝胶工业生产过程复杂。Apligraf通过特殊的培养装置已解决了产品收缩问题。

尽管目前的临床应用报道这些产品的使用是安全、有效的，但也应注意其可能潜在的对人体的不利方面。Apligraf虽已被FDA批准用于治疗小腿静脉性溃疡、糖尿病性溃疡，但在临床应用中，还是陆续发现了一些问题。在接受Apligraf的部位或其他部位，可能出现感染，包括蜂窝织炎、骨髓炎等，甚至全身感染、非神经源性皮肤改变、水疱、红斑、疼痛（可能是全身疼痛）、溃疡恶化，并可能发生一些全身症状，如发热等。

对移植到创面的Apligraf的代谢问题，一般认为它存在的时间短，逐渐降解，而被受体细胞的自然重建替代。Griffiths对Apligraf修复急性创面时的存在时间进行了研究，构建皮肤的细胞源于男性，14例女性创面接受Apligraf，移植后细胞中的Y染色体用PCR检测。结果发现4周后移植物的特征几乎消失，说明它在处理急性伤口中起暂时性生物敷料的作用。

（朱堂友　伍津津）

参 考 文 献

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