1．检验目的
检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。
2．检验原理
2.1 凝聚胺法 利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集解散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能解散，以此来判断供、受者间血液的相容性。
2.2 微柱凝胶法 微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
2.3 玻璃珠微柱法 微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂（抗-IgG和抗补体C3），红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
3．适用范围
适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。
4．设备性能参数
各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。
5．器材与试剂
5.1器材：KA-2200血清学专用离心机、B 600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Autovue Innova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管（100 mm×12 mm和75 mm×12 mm）、试管架、一次性塑料滴管、记号笔；
5.2 试剂 ：Diana DG Gel Coombs卡、DiaMed Coombs卡、Othro Biovue Coombs卡、生理盐水、凝聚胺配套试剂（LIM液、Resuspending液、Polybrene液）、专用稀释液（DIL2、DG GEL sol或BLISS液）。
6．标本要求
6.1 患者样本：EDTA-K3或EDTA-K2抗凝全血，全血量3～5ml，1 760 r/min离心5min，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。紧急情况下可以使用抗凝动脉血；
6.2 供者标本：枸橼酸盐抗凝全血，全血量3～5 ml，1 760 r/min离心5 min，离心后无溶血、无凝块及明显乳糜。
7．校准步骤
各类全自动血型检测系统的校准操作过程分别见《WADiana全自动血型配血系统标准操作程序》、《SWING-SAXO血型配血系统标准操作程序》、《Techno全自动血型配血系统标准操作程序》、《强生Othro Autovue Innova全自动血型及配血系统标准操作程序》。
8．操作程序
8.1 凝聚胺法交叉配血操作程序
8.1.1 取洁净硬质试管二支，标明主、次侧，主侧管加入受血者血清（血浆）2滴，供血者3%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管加供血者血清2滴，受血者3%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴；
8.1.2 各试管分别加LIM液0.65 ml，充分混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀；
8.1.3 血型血清学专用离心机1 000 r/min，离心15 s，把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1 ml液体；
8.1.4 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做以上步骤；
8.1.5 最后加入Resuspending液2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果在30 s～1 min内凝集散开，代表是由Polybrene引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如反应可疑，可进一步涂在玻片上用显微镜观察。
8.2 WADiana全自动血型配血系统交叉配血操作程序
参照《WADiana全自动血型配血系统标准操作程序》进行。
8.3 SWING-SAXO血型配血系统交叉配血操作程序
参照《SWING-SAXO血型配血系统标准操作规程》进行。
8.4 Techno全自动血型配血系统交叉配血操作程序
参照《Techno全自动血型配血系统标准操作程序》进行。
8.5 Autovue Innova全自动交叉配血操作程序
参照《强生Othro Autovue Innova全自动血型及配血系统标准操作程序》进行。
8.6 检验结果的输入与确认
8.6.1 启动“配发血管理程序”，输入用户名及口令后，点击进入“填写配血结果”。
8.6.2 自动传输结果的输入 单击“自动传输”菜单，选择相应配血批次，仪器会自动传输配血结果，核对、确认后保存。
8.6.3 非传输结果的输入 单击“手工填写”菜单，核对供受者血液信息及配血结果后手工填写，确认后保存。
9．质量控制
9.1 室内质量控制
9.1.1 凝聚胺试剂质控：每日（或当日更换试剂包装时）进行试剂质控，具体操作参照《输血相容性检测室内质量控制管理程序》进行；
9.1.2 全自动卡式抗人球法质控：每日（或当日更换试剂批号时）进行过程质控，具体操作参照《输血相容性检测室内质量控制管理程序》进行。
9.2 室间质量评价
参加卫生部临检中心组织的全国输血相容性检测室间质量评价活动。
10．干扰因素
10.1 严重的黄疸、溶血或脂血使全自动血型检测系统判读结果时出现假阳性；
10.2 冷凝集素或异常球蛋白增高会使红细胞出现异常凝集，手工交叉配血时主侧和（或）次侧出现假阳性结果。
11．结果计算及测量不确定度
不适用。
12．生物参考区间
不适用。
13．检验结果可报告区间
相合或不相合。
14．警告/危急值
发现交叉配血不合时要尽可能查明原因,必要时进行多样本配血筛查，寻找合适的供者。如果找不到合适的供者，应及时通知临床医生（手术患者应停止手术或手术延期）；如果找到合适的供者，需要和临床医生确认申请量是否足够，是否需要追加申请量。
15．实验室解释
交叉配血结果不相合一般由同种不规则抗体、自身抗体、异常蛋白干扰或供受者之间血型不同等原因所致。
16．安全性预警措施
16.1 实验室及工作人员一般安全防护措施参见《实验室安全与卫生管理程序》。
16.2 发生血液标本溢出时，应参照《实验室消毒与清洁程序》对污染的环境进行消毒处理。
16.3 操作人员发生职业暴露时，应参照《实验室职业暴露预防与处理程序》及时进行相应处理。
16.4 在仪器运转过程中，勿触及样品针、移动的传输装置等，避免造成人身伤害。禁止触摸仪器密封面板内的电路，防止造成电击损伤。
16.5 对突发传染性疾病的血液标本应启动特殊的安全防护程序。
17．变异潜在来源
不规则抗体、自身抗体、冷凝集等都可以导致主侧和（或）次侧交叉配血不合。产生不规则抗体的患者多数由于后天免疫造成，一般都有输血史或妊娠史，少数人也会产生天然抗体。
18．交叉试验特别注意事项
18.1 凝聚胺法
18.1.1 离心后，倒掉上清，不要沥干，让管底残留约0.1 ml液体。
18.1.2 按照加样顺序进行结果观察，确保每一个反应结果都能在1 min内观察，否则弱凝集散开会出现假阴性。
18.2 全自动卡式配血试验 参照各仪器标准操作规程中约定的注意事项。
19．报告时间
急诊交叉配血试验于输血科收到申请单后40 min、绿色通道患者于输血科收到申请单后20 min、普通治疗和手术备血患者于申请用血时间之前出结果并上传HIS系统。
20．参考文献
[1] WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Autovue Innova全自动血型及配血系统、凝聚胺试剂使用说明书．
[2] 临床输血技术规范．中华人民共和国卫生部医政司．北京，2000．
[3] 中国输血技术操作规程（血站部分）．中华人民共和国卫生部医政司．天津，
1997．
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