红细胞的渗透脆性实验

实验二　红细胞的渗透脆性实验

一、实验目的

1.观察红细胞在低渗溶液中的形态变化，理解血浆渗透压对维持红细胞正常形态与功能的重要性。

2.掌握测定红细胞渗透脆性的方法。

二、实验原理

红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的特性，称为红细胞渗透脆性。将红细胞置于0.9%的NaCl溶液中，细胞可保持正常的形态和体积，但若将红细胞置于一系列浓度递减的低渗NaCl溶液中，则红细胞会膨胀，乃至破裂溶血。我们认为，开始出现溶血现象的NaCl溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（正常为0.40%～0.45%NaCl溶液），出现完全溶血现象的NaCl溶液浓度，是该血液红细胞的最大抵抗力（正常为0.30%～0.35%NaCl溶液）。

三、实验对象

人或家兔。

四、实验器材

小试管10支、试管架、2mL注射器、8号注射器针头、止血带、棉签。

五、实验药品

1%NaCl溶液、75%乙醇、4%碘酒、蒸馏水。

六、实验步骤

1.配置不同浓度的低渗NaCl溶液

取干燥洁净的小试管10支，分别编号后依次排列在试管架上，按表3－2－1所示的剂量准确地将1%NaCl溶液和蒸馏水分别加入各试管内，混匀后即配置出10种不同浓度的NaCl低渗溶液，每个试管内溶液的量均为2mL。

表3－2－1　不同浓度的NaCl溶液的制备

2.采血

用4%碘酒、75%乙醇常规消毒肘正中静脉处的皮肤，再用灭菌、干燥的注射器采血1mL，向每支试管中各加1滴，使血液与各试管内的NaCl溶液充分混匀，室温下静置1～2h。

该实验也可用家兔血液进行操作，可于耳缘静脉取血或直接做心内穿刺取血。

3.观察各试管液体的颜色和透明度，从而判断是否有溶血。

（1）未溶血 试管底层有下沉红细胞呈混浊红色，上层液体无色透明，表示红细胞未破裂而下沉管底。

（2）不完全溶血 试管底层有下沉红细胞呈混浊红色，上层液体呈透明浅红色，表示有部分红细胞已破裂溶解。记录此时溶液浓度，可确定为该血液红细胞的最小渗透抵抗力。

（3）完全溶血 试管内液体完全变成透明的红色，试管底层无红细胞沉积，表示红细胞全部破裂溶解。此时的溶液浓度，可确定为该血液红细胞的最大渗透抵抗力。

七、注意事项

1.配制溶液要精确，以确保每支试管内溶液的浓度和容量准确，标清编号，以免混淆。

2.每支试管内滴入的血滴大小应尽量一致，只加1滴。

3.血液滴入试管后应迅速混匀，但动作要轻，以免造成红细胞破损，出现非渗透脆性溶血。

4.采血时须严格消毒，以防感染。

5.观察结果时，以白色为背景进行观察更为清晰。

八、思考题

1.测定红细胞的渗透脆性有什么临床意义？

2.输液时为什么常以等渗溶液为载体？

3.为什么同一个体血液的红细胞渗透脆性不一样？