巴布科克法和盖勃氏法

这两种方法都是测定乳脂肪的标准方法，适用于鲜乳及乳制品的测定，但不适宜对含糖多的乳品(如甜炼乳、加糖乳粉等)，因为采用此方法时硫酸易使糖焦化，使测定结果的误差较大。这两种方法操作简单、迅速，对大多数样品来说其测定精度满足要求，但不如罗兹-哥特里法准确。

1.原理

利用浓硫酸酸解乳中的乳糖和蛋白质等非脂肪成分，将牛奶中的酪蛋白钙盐转变成可溶性的重硫酸酪蛋白，脂肪球膜被破坏，脂肪游离出来，再利用加热离心，使脂肪完全迅速分离，直接读取脂肪层可知被测乳的含脂量。

2.试剂及仪器

1)试剂

①浓硫酸98%(体积分数)。

②异戊醇(分析纯)。

2)仪器

巴布科克氏乳脂瓶: 颈部刻度有0.0% ～0.8%，0.0% ～10.0%两种，最小刻度值为0.1%; 盖勃氏乳脂计及盖勃氏离心机: 颈部刻度有0.0%～0.8%，最小刻度值为0.1%; 标准移乳管(17.6m L，11m L); 离心机。

3)操作步骤

(1)巴布科克法

①以标准移乳管精确吸取20℃均匀鲜乳17.6m L于巴布科克氏乳脂瓶中。

②沿瓶颈壁加入17.5m L浓硫酸(15～20℃)，将瓶颈回旋，充分混合至无凝块并呈均匀的棕色。

③将乳脂瓶放入离心机1000r/min离心5min，脂肪分离升至瓶颈基部。

④取出加入60℃以上热水使脂肪上浮到瓶颈基部，再离心2min。

⑤再加入60℃以上热水至脂肪上浮到2或3刻度(瓶颈刻度标线约4%)处，再离心1min。

⑥取出置于55～60℃水浴5min后，保温数分钟，待脂肪稳定后，读取脂肪层最高与最低点所占的格数(读数时以上端凹面最高点为准)，即为样品含脂肪的百分率。

(2)盖勃氏法

①将10m L硫酸倒入盖勃氏乳脂瓶中(颈口勿沾湿硫酸)。

②精确吸取11m L牛乳沿管壁缓缓加入盖勃氏乳脂瓶中。

图7－2 巴布科克氏乳脂瓶

③加入1m L异戊醇，用橡皮塞塞紧，用布包裹瓶口(以防冲出酸液溅蚀衣物)，用力振摇至呈均匀棕色液体，静置数分钟。置于65～70℃水浴中5min。

④取出擦干，调节橡皮塞使脂肪柱在乳脂计的刻度内，放入离心机800～1000r/min中离心5min。

⑤取出将乳脂计置于65～70℃水浴(水浴水面应高于乳脂计脂肪层)5min，取出后立即读数，即为脂肪的含量。

4)说明及注意事项

①硫酸可破坏脂肪球膜，使脂肪游离出去，还可增加液体相对密度，使脂肪易浮出。

②硫酸浓度应严格遵守规定要求，过浓会使乳炭化成黑色溶液而影响读数，过稀不能使酪蛋白完全溶解，使测定结果偏低并使脂肪层浑浊。

③异戊醇作用是促使脂肪析出，并降低脂肪球表面张力，利于形成脂肪层。异戊醇应能完全溶于酸中，如果不纯，可能会使部分析出物掺入油层，使结果偏高。检验异戊醇纯度的方法如下: 将硫酸、水(代替牛乳)及异戊醇按测定样品时的数量注入乳脂计中，振摇后静置24h澄清，如在乳脂计的上部狭长部分无油层析出，认为适用，否则表明异戊醇质量不佳，不能采用。

④加热(65～70℃水浴)和离心的目的是促使脂肪离析，注意水浴水面应高于乳脂计脂肪层。