茶多酚对吸烟引起的脂质过氧化的保护作用

1．茶多酚对吸烟气相物质引起的大鼠肺细胞膜损伤的保护作用

（1）吸烟气相自由基对大鼠肺细胞膜的损伤作用：将大鼠肺细胞从大鼠肺组织分离，再直接通入烟雾，测定TBA反应物，同时用脂肪酸自旋标记物分别标记细胞膜的极性端和疏水端，测定ESR波谱，计算程序参数和旋转相关时间。结果发现，随通烟时间延长，TBA反应物含量增加。说明肺细胞膜脂质过氧化程度增大。细胞膜极性端序参数随通烟时间延长呈明显下降趋势，说明吸烟烟气使细胞膜流动性增加，而疏水端的程序参数和旋转相关时间没有明显变化，说明吸烟气相物质对细胞膜疏水端影响不大。

（2）茶多酚对大鼠肺细胞受吸烟气相物质损伤的保护作用：预先在大鼠肺细胞中加入茶多酚，在相同通烟时间下，大鼠肺细胞的脂质过氧化程度随茶多酚浓度增加而降低，说明茶多酚对吸烟气相物质引起的大鼠肺细胞脂质过氧化有明显的抑制作用。随茶多酚浓度增加，极性端的序参数逐渐回升，在茶多酚浓度为0.1mg/ml时，其序参数几乎恢复到不通烟时间的数值，说明茶多酚可以保护烟雾对大鼠肺细胞膜的损伤作用。

2．茶多酚对烟雾引起中国仓鼠肺V79细胞损伤的保护作用　中国仓鼠肺V79细胞采用人工培养，经两层cambridge滤纸过滤后的香烟烟雾通入细胞，对照样品通入同样流量的空气。通烟后V79细胞膜的脂质过氧化程度仍用TBA法来测定，细胞膜流动性仍采用脂肪酸的自旋标记及ESR测试，计算程序参数S和旋转相关时间Υc同时用马来酰亚胺自旋标记细胞膜蛋白巯基，测量和计算强弱固定化比值。

（1）对照香烟烟雾导致Υc，细胞活力下降和细胞膜脂质过氧化及膜生物物理性质的改变：随通烟时间的延长，Υc活细胞数目逐渐减少，TBA反应物含量增加，表明Υc细胞膜的脂质过氧化程度增大。用极性端和疏水端标记的图谱计算的序参数S（极性端）和旋转相关时间Υc，可看出极性端的序参数S随通烟时间的延长而减少，而疏水端的旋转相关时间Υc则没有明显的变化，这说明吸烟烟雾增大了细胞膜浅层的流动性，对深层则影响不大。从马来酰亚胺标记细胞的ESR波谱计算的强弱固定化比值S/W，可看出S/W随通烟时间的增加而增大，表明膜蛋白上巯基结合位点处结构变得紧密，这说明吸烟烟雾改变了膜蛋白的构象。

（2）茶多酚对吸烟烟雾细胞毒性作用的抑制：茶多酚使细胞死亡数和TBA反应物都比对照组减少。用极性端标记的结果，可以看出，茶多酚对V79细胞膜浅层的流动性受吸烟烟雾的影响明显减少，表现为序参数S逐渐回升，说明茶多酚降低了吸烟烟雾引起的细胞膜流动性的改变。用马来酰亚胺标记的结果可以看出茶多酚降低了吸烟烟雾引起的S/W的增加。

从以上结果可以看出茶多酚可以清除吸烟产生的有害自由基，抑制吸烟气相物质引起的细胞膜脂质过氧化，保护细胞不受吸烟产生的自由基的损伤作用。

中国科学院生物物理研究所和北京卷烟厂合作研制的低自由基低毒香烟可明显减少吸烟产生的有害自由基，特别是气相自由基，减少吸烟引起的急性毒性和长期致突致畸和致癌作用，这将为减少吸烟对人类的毒害发挥作用。

戒烟运动在西方国家一浪高过一浪，吸烟人数呈直线下降。在我国吸烟人数不仅没有下降，而且还在朝年轻化方向发展。为了减少吸烟对人类的毒害，在戒烟的同时，研究一些低自由基低毒香烟还是很有必要的。

在减少香烟的毒性成分时，最简单和比较有效的方法是在香烟的过滤嘴中注入天然抗氧化剂和可以清除自由基的有效成分。同时要了解香烟的毒性成分不仅仅是尼古丁，氢相自由基、过氧化自由基都对人体有害。因此用其他生物类黄酮，尤其是比较稳定有效的前花青素（例如碧萝芷）加入到香烟的过滤嘴中，其降低香烟的毒性，可能比茶多酚的效果更好。

参考文献

[1]世界癌症研究基金会/美国癌症研究所.食物、营养、身体活动和癌症预防——全球性的展望.Washington D C.AICR 2007中文版，2008年10月.

[2]中国卫生部.中国肺癌发病率上升，中国肺癌发病率居所有癌症之首.中国卫生部网站.

[3]赵保路.自由基讲座（一），（二）.北京烟草，1994；4（21）：1-25.

[4]赵保路.吸烟、自由基和癌.自然杂志，1988；12：453-456.

[5]赵保路.吸烟、自由基和心脏病.自然杂志，1989；12：655-657.

[6]赵保路，张春爱，忻文娟.心肌缺血再灌注损伤和活性氧自由基.生理科学，1989；9：193-197.

[7]Church DF,Pryor WA.Free radical chemistry of cigarette smoke and its toxicological implications.Environ Health Perspect,1985;64:111-123.

[8]Yah LJ,Zhao BL,Xin WJ.Experimental studies on smoke aspects of toxicological effects of gas phase cigarette smoke.Research Chem.Interm,1991;16:15-24.

[9]杨法军，赵保路，忻文娟.用ESR自旋捕集法研究吸烟烟雾处理的脂质体对大鼠粒细胞产生O2的影响.生物物理学报，1992；8：659-663.

[10]杨法军，赵保路，忻文娟.香烟气相物质引发的脂质过氧化与粒细胞呼吸爆发关系的ESR研究.环境科学学报，1993；13：355-359.

[11]杨法军，赵保路，忻文娟.吸烟烟雾引起鼠肝微粒体脂质过氧化的ESR波谱研究．环境化学，1993；12：117-125.

[12]Diana JN,Pryor WP.Tobacco smoking and nutrition.Annals of New York Academy of Science,1993;686:66-126.