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根据的比活鉴定

时间:2022-02-10 理论教育 版权反馈
【摘要】:14.1 根据SOD的比活鉴定所谓比活,是指单位质量酶蛋白中所含SOD的活性单位数,可以用u/mg蛋白,即单位/毫克蛋白质表示。在酶比活测定中,测定蛋白质含量的方法有Lowry法、Bradford法、双缩脲法、紫外吸收法、HPLC法等。为保证产品质量可比性,一定要注明SOD的活性测定方法和蛋白质含量测定方法。McCord和Fridovich在1969年制备的牛红细胞SOD,比活为3 300u/mg蛋白,其测活方法为黄嘌呤氧化酶-细胞色素c法,蛋白质含量采用Lowry法测定。
根据的比活鉴定_超氧化物歧化酶

14.1 根据SOD的比活鉴定

所谓比活,是指单位质量酶蛋白中所含SOD的活性单位数,可以用u/mg蛋白,即单位(u)/毫克蛋白质表示。比活越高,表示酶越纯。

在酶比活测定中,测定蛋白质含量的方法有Lowry法、Bradford法、双缩脲法、紫外吸收法、HPLC法等。其中,Lowry法、Bradford法、双缩脲法三种方法都是基于蛋白质的特殊性质,通过与某种试剂反应产生特定的显色来进行定量的,这三种方法的准确度较好,但是容易受到其他成分的干扰而影响定量结果。在上述方法中,进行蛋白质定量测定最准确的方法是HPLC法,它可以通过标准对照品进行外标定量,从而计算出产品中蛋白质的含量。为保证产品质量可比性,一定要注明SOD的活性测定方法和蛋白质含量测定方法。

McCord和Fridovich在1969年制备的牛红细胞SOD,比活为3 300u/mg蛋白,其测活方法为黄嘌呤氧化酶-细胞色素c法(经典McCord法),蛋白质含量采用Lowry法测定。表14-2为Sigma公司提供的有关SOD的品种和比活。Sigma公司三种类型的SOD都有,但主要是Cu,Zn-SOD。表中①表示的是华东理工大学研制的SOD,有猪红细胞SOD和重组hSOD。

表14-2 各种来源SOD的比活

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续 表

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