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杂种细胞的筛选

时间:2022-10-06 百科知识 版权反馈
【摘要】:抗性互补筛选是利用亲本细胞原生质体对抗生素、除草剂及其他有毒物质抗性差异选择杂种细胞。

在原生质体融合后的群体中,有亲本、同核体(同源原生质体的融合体)、异核体(非同源的原生质体的融合体)、多核体(含有双亲不同比例核物质的融合体)、异胞质体(具有不同胞质来源的杂合细胞)和核质体(有细胞核而带有少量细胞质的亚原生质体)。杂种细胞的筛选就是从中区分出预期的融合重组类型,常用杂种细胞筛选方法如下:

1)根据物理特性筛选

根据亲本原生质体大小、颜色、漂浮密度及电泳迁移率、形成愈伤组织的差异和荧光标记选择等筛选杂种细胞。

2)根据生长特性筛选

利用原生质体对培养基成分要求与反应差异选择杂种细胞(见图5.12)。

图5.12 矮牵牛+爬山虎融合体的生长互补选择

3)根据其遗传和生理生化特性的互补选择

互补选择法是指利用两个亲本具有不同遗传和生理特性,在特定培养条件下,只有发生互补作用的杂种细胞才能生长的选择方法,有遗传互补筛选法、抗性互补选择法、营养代谢互补选择法和生长互补选择法等。其中遗传互补筛选法是利用每一亲本贡献一个功能正常等位基因,纠正另一亲本缺陷,令杂种细胞表现正常的筛选方法。抗性互补筛选是利用亲本细胞原生质体对抗生素、除草剂及其他有毒物质抗性差异选择杂种细胞。

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