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杂合体的鉴别与筛选

时间:2022-02-11 百科知识 版权反馈
【摘要】:杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞,一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养,再生出细胞壁后转移到合适的培养基中,待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中,可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。
杂合体的鉴别与筛选_科学目击者

杂合体的鉴别与筛选

双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞,一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养(液体或固体),再生出细胞壁后转移到合适的培养基中,待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中,可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。

根据一些特征,可以在显微镜下直接识别杂合细胞,这些特征有:若一方细胞大,另一方细胞小,则大、小细胞融合的就是杂合细胞;若一方细胞基本无色,另一方为绿色,则自绿色结合的细胞是杂合细胞;如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征,则可作为识别杂合的标志;发现上述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出,移置再生培养基培养。

还可以用互补法筛选杂合细胞。显微鉴别法虽然比较可信,但实验者有时会受到仪器的限制,工作进度慢且未知其能否存活与个长遗传互补法则可弥补以上不足。遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系,例如白化互补、生长互补、抗性互补、代谢互补等。

采用细胞与分子生物学的方法也可以鉴别杂合体,经细胞融合后长出的愈伤组织或植株,可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶(具有相同功能的酶)分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性。

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