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酸洗脱法检测

时间:2022-06-30 百科知识 版权反馈
【摘要】:而其他含HbA的红细胞被酸洗脱,不能被伊红着色。将血涂片浸于pH3.3的酸性缓冲液中,37℃5min,水洗后晾干。用伊红染液染色1min,水洗晾干,油镜计数1 000个红细胞,求出阳性红细胞的百分率。遗传性HbF持续综合征患者,全部红细胞呈均匀淡红色的阳性细胞。再生障碍性贫血及溶血性贫血也可出现数量较少的阳性红细胞。

【原理】 HbF除抗碱能力外,抗酸能力也较HbA强,将血涂片于酸性缓冲液中孵育,只有含HbF的红细胞不被洗脱,再用伊红染色而呈鲜红色。而其他含HbA的红细胞被酸洗脱,不能被伊红着色。

试剂

1.80%乙醇

2.pH3.3的酸性缓冲液 从35.81g磷酸氢二钠溶于500ml蒸馏水中取24.6ml,与从9g无水枸橼酸钠溶于500ml蒸馏水中取75.4ml混合。

3.伊红染液。

【操作方法】 常规制备血涂片,自然干燥,再用80%乙醇固定5min,水洗晾干。将血涂片浸于pH3.3的酸性缓冲液中,37℃5min,水洗后晾干。用伊红染液染色1min,水洗晾干,油镜计数1 000个红细胞,求出阳性红细胞的百分率。

【参考值】 成人阳性细胞小于1%,新生儿阳性细胞可达60%~70%。

【临床意义】 珠蛋白生成障碍性贫血病人,轻型者(杂合子)仅少数红细胞呈阳性,重型者阳性红细胞明显增多。遗传性HbF持续综合征患者,全部红细胞呈均匀淡红色的阳性细胞。再生障碍性贫血及溶血性贫血也可出现数量较少的阳性红细胞。

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