革兰阴性无芽胞厌氧杆菌

一、革兰阴性无芽胞厌氧杆菌

革兰阴性无芽胞厌氧杆菌是一大群不形成芽胞的厌氧杆菌。种类较多，其主要菌属有类杆菌属、普雷沃菌属、紫单胞菌属和梭杆菌属等。

(一)类杆菌属

类杆菌属(Bacteroides)是一类临床上最重要的革兰阴性无芽胞厌氧杆菌，主要寄生在口腔和肠道，包括18个种。代表菌为脆弱类杆菌(B．fragilis)。

本菌为革兰阴性杆菌，长1．6～8μm，宽0．8～1．3μm，多数菌种两端圆而浓染，着色不均，中间不易着色或染色较浅，似空泡。培养物涂片可呈多形性。无鞭毛，无芽胞，脆弱类杆菌可形成荚膜。

本菌专性厌氧，在厌氧血琼脂平板上经24～48 h培养，形成直径1～3 mm，圆形微凸、半透明、灰白色、表面光滑、边缘整齐的菌落，多数菌株不溶血。培养基中加入维生素K₁、氯化血红素和20%胆汁(或2 g/L胆盐)可促进脆弱类杆菌群等菌种生长。在胆汁七叶苷(BBE)培养基上生长旺盛，菌落较大，能分解胆汁七叶苷，菌落周围有黑色晕圈。脆弱类杆菌能发酵葡萄糖、蔗糖和麦芽糖，水解七叶苷，耐20%胆汁，并生长旺盛。尿素酶阴性，不能还原硝酸盐。

类杆菌属是寄居于人的口腔、肠道及女性生殖道的正常菌群，是临床上最常见的厌氧菌感染病原菌之一，可引起内源性感染。以脆弱类杆菌最重要，占临床厌氧菌分离株的首位，可引起脓胸、女性生殖系统感染、颅内感染及菌血症等。

根据不同感染部位采集血液、脓汁或组织等。标本直接涂片，经革兰染色镜检，见革兰阴性无芽胞杆菌，着色不匀，且具有呈多形性，应考虑类杆菌。分离培养时标本接种于厌氧血琼脂平板及和BBE平板，经37℃48 h厌氧培养后，观察其形成菌落的特征。再根据生化反应作鉴定。

(二)普雷沃菌属

普雷沃菌属(Prevotella)是近年从类杆菌属分出的一个新菌属，包括20个种，其中不产色素的有12种，产黑色素的有8种。代表菌是产黑色素普雷沃(P．melaninogenica)。本属细菌主要寄居在于人类口腔、女性生殖道，可引起这些部位的内源性感染。

本属细菌为革兰阴性球杆菌，两端钝圆，有浓染和空泡，具有多形性，无荚膜、无鞭毛、无芽胞。本属细菌专性厌氧。在厌氧血琼脂平板上生长良好，经48 h培养后形成直径0．5～3 mm，圆形、微凸、半透明的菌落，多数菌株呈β－溶血。产黑色素的细菌其菌落初形成时为灰白色、后呈黄色，逐渐变为浅棕色，5～7 d后变为黑色。在色素产生之前，用波长366 nm紫外线在暗室照射，可见橘红色荧光，色素出现后则无荧光。本属绝大多数菌株在含20%胆汁的培养基中不生长，在培养基中加入氯化血红素和维生素K₁可促其生长。多数菌种发酵葡萄糖、乳糖和蔗糖，触酶和脂酶多数阴性。

在感染病变部位采取标本，厌氧送检。镜检为革兰阴性球杆菌，两端钝圆着色不均。接种于血琼脂平板厌氧培养，观察菌落形态。结合生化试验或气液相色谱检测其代谢产物，报告结果。

(三)紫单胞菌属

紫单胞菌属(Potphyromnas)是从类杆菌属分出的一个新菌属，现有12个种，与人类有关的主要有3种细菌，其代表菌是不解糖紫单胞菌(P．saccharolytica)。

紫单胞菌属主要分布于人类口腔、肠道和泌尿生殖道，在正常人的检出率较低。主要引起人类牙周炎、牙髓炎等口腔感染，也可引起阑尾炎和细菌性阴道炎等。

本属菌为革兰阴性杆菌或球杆菌，菌体长1．5～3．5μm，宽0．8～1．5μm，染色不均，无鞭毛，无芽胞。专性厌氧，在厌氧血琼脂平板上形成直径1～3 mm、有光泽、光滑、圆形、凸起的棕色菌落，继续培养6～10 d后转为黑色菌落。在色素未产生之前，用波长366 nm的紫外线照射，可见红色荧光。本属细菌均产生色素，不发酵糖类，吲哚阳性，触酶阴性。

采集病变部位标本。镜检为革兰阴性球杆菌或杆菌，两端钝圆，着色不均。接种于血平板厌氧培养，观察菌落形态特点。结合生化试验或气液相色谱检测其代谢产物，报告结果。

(四)梭杆菌属

本属菌共有16个种，临床常见的有7种。代表菌是具核梭杆菌(F．nucleatum)。

梭杆菌属是人和动物的口腔、上呼吸道、肠道及泌尿生殖道的正常菌群。可引起口腔、胸腔、肺脓肿等部位的感染。本菌可从副鼻窦炎、化脓性胸腹膜炎、肝脓肿、肠道感染、尿路感染等多种临床标本中分离到。

本菌为革兰阴性杆菌，菌体细长呈梭性，有时菌体中有革兰阳性颗粒存在。无鞭毛、无芽胞。在厌氧血琼脂平板上生长良好，经48 h培养后，形成直径1～2 mm，圆形、光滑、凸起、灰白色、透明或半透明的菌落。典型菌株呈不规则圆形、面包屑样，用透视光观察菌落常显示珍珠光斑点，一般不溶血。陈旧菌落的外周围常可见一扩散环，但菌落呈R型。生化反应不活泼，多数菌株不发酵糖类，吲哚和DNA酶试验阳性，酯酶和触酶试验阴性，不能还原硝酸盐。