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血管活性肠肽测定

时间:2022-04-20 理论教育 版权反馈
【摘要】:血管活性肠肽也称舒血管肠肽,是Said等人于20世纪70年代初从猪的小肠中分离出来的一种肽类物质,由28个氨基酸组成,分子量3827,其结构与胰泌素、胰升血糖素和肠抑胃肽相似,属胰泌素族。

一、概 述

血管活性肠肽(vasoactive intestinalpeptide,VIP)也称舒血管肠肽,是Said等人于20世纪70年代初从猪的小肠中分离出来的一种肽类物质,由28个氨基酸组成,分子量3827,其结构与胰泌素、胰升血糖素和肠抑胃肽相似,属胰泌素族。VIP主要由消化道的D细胞分泌,其生理作用有:①抑制食物,组胺和五肽胃泌素引起的胃酸和胃蛋白酶的分泌;②增强胰腺对胰泌素和胆囊收缩素的反应,刺激胰碳酸氢盐的分泌;③抑制胆囊的静止张力和由胆囊收缩素引起的胆囊收缩,拮抗胰泌素引起的胆道分泌作用;④引起强烈的肠分泌,造成水样泻。

二、病人准备

药物:生长抑素和它的衍生物奥曲肽干扰血浆VIP的测定应停药后再行检查;其他的治疗性药物是否会干扰血浆VIP的测定目前尚不清楚。

三、标本采集

1.采集时间 清晨空腹10~12h以上,用预冷注射器EDTA盐抗凝,采集静脉血10ml,采血后立即每毫升样本中加入25U的肝素和1000k U的阿托品,因为血浆蛋白酶可以迅速破坏VIP,血样本加入肝素和阿托品可降低其破坏,随即迅速地将样本在冰中冷却并立即送检。

2.标本保存 在4℃低温离心机中3000r/min×30min离心分离血浆,如不能立即测定应在-20℃以下冷冻保存可稳定2~3年;不能反复冻融。

四、试验方法及正常参考范围

酶联免疫吸附法:用纯化的VIP抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的VIP抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的VIP呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(值),计算样品浓度。

正常参考范围 北京协和医院报道,空腹水平<60ng/L,一般空腹血浆VIP较低,约为5.0pmol/L。

五、临床意义

VIP增高的常见疾病有VIP瘤、短肠综合征、尿毒症及其他,如胰岛素瘤、神经系统肿瘤、结核性脊柱炎、肝硬化、弥漫性硬化症、脑萎缩等均可引起VIP增高。

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