液质联用技术进行定性分析的认定准则

三、液质联用技术进行定性分析的认定准则

对于复杂生物基质中化合物的检测，液质联用技术具有无可争辩的确认能力。然而，采用液质联用技术分析时，通过目标分析物对照品与阳性样本中目标分析物的色谱保留时间和诊断离子的相对丰度进行对照，来判断目标分析物，这一确认过程非常重要，因此目标化合物的认定必须遵循一定的原则。对法医毒物分析领域所涉及的毒物分析，建议参照世界反兴奋剂机构（World Anti-Doping Agency，WADA）所公布的技术文件TD2003IDCR，确立目标化合物的定性认定准则。在这一技术文件中，与GC/ MS相比，LC/MS和LC/MS_n等的标准相对可以放宽。

1．色谱分离WADA技术文件TD2003IDCR对液相色谱作出了以下规定，样品中的目标化合物与同批次的标准物质（或对照品）、添加在样品中的标准物质（或对照品），其保留时间的误差应小于2%或±0．4 min。在进行定性认定分析时，目标化合物与标准物质（或对照品）的浓度应相匹配，如果出现保留时间因样品超载而发生漂移的情况，则应稀释后重新进样。

2．质谱检测对于质谱检测，WADA的TD2003IDCR技术文件规定：任何诊断离子的相对强度与加入样品、参考样品或参考物质所测得的同样离子的相对强度的差异均不得大于一定的值。例如，对于LC/MS，相对丰度少于5%的诊断离子不能作为判定依据。无论对于LC/MS还是LC/MS_n，当诊断离子的相对丰度大于50%时，诊断离子的相对强度与加入样品、参考样品或参考物质所测得的同样离子的相对强度的差异可放宽到±15%。当诊断离子的相对丰度为25%～50%时，相对强度的差异可放宽到±25%。当诊断离子的相对丰度小于25%时，相对强度的差异等可放宽到±10%。

对于单极质谱检测而言，无论是全扫描模式还是选择离子监测模式，均需保证有3个以上的诊断离子，且其相对丰度应大于5%，相对丰度少于5%的诊断离子不能作为判定依据。如果没有3个诊断离子符合要求，则需用第2种衍生化方法，或第2种离子化和碎裂方式。第2种衍生化方法必须提供不同的诊断离子，而第2种离子化和碎裂方式必须基于不同的物理原理，且亦应提供不同的诊断离子，任何不改变质谱离子而只改变离子相对丰度的方法都是禁止使用的。

应用串联质谱方法时可采用full scan或SRM模式进行分析。无论是full scan还是SRM模式，必须选择合适的碰撞条件，以保证前体离子能产生MS/MS或获得SRM。采用SRM分析时，筛选分析选取一对母离子－子离子对，确证分析时则扩充至两对母离子－子离子对，目标物的2个母离子－子离子对峰面积的比率与标准对照品的2个母离子－子离子对峰面积的比率，其相对误差小于±15%。