振荡烧瓶试验

本试验是根据抑菌药物抑菌率的大小来判断其是否具有抑菌能力。其原理是在液体中，通过快速长时间的振荡，增加微生物与抗菌产品内抑菌药物的接触以显示其抑菌作用。多用于对非溶出性抗菌产品，如非溶出性抑菌药物的抗菌塑料、抗菌涂料、抗菌织物，抗菌瓷砖等的鉴定。

【试验准备】

1.菌种与培养液　试验菌种和培养液同抑菌环试验。

2.试验用液体　磷酸盐缓冲液（PBS，0.03mol／L pH　7.2～7.4）。

3.试验器材　振荡摇床（300r／min）和三角烧瓶。

【操作步骤】

1.制片　将抗菌物品剪切成10mm× 10mm样片，称取0.75g分装包好。

2.试验　将0.75g重的样片放入250ml的三角烧瓶中，分别加入70ml PBS和5ml菌悬液混匀，使菌悬液在PBS中的浓度为1 ×104～2×104cfu／ml。将三角烧瓶固定于振荡摇床上，以300r／min振荡1h。

3.接种培养　取0.5ml振摇后的样液，或用PBS做适当稀释后的样液，以琼脂倾注法接种平皿，按本章第二节进行活菌培养计数。

4.对照组　试验同时设阴性对照样片和不加样片组。对照样片组除以不含抗菌药物的材质、大小相同的样片代替抗菌样片外，其他操作程序均与试验组相同。不加样片组分别取5ml菌悬液和70mlPBS加入－个250ml三角烧瓶中，混匀，分别于0时间和振荡1h后，各取0.5ml菌悬液与PBS的混合液做适当稀释，活菌培养计数同前。试验重复3次。按下式计算抑菌率：

抑菌率＝

【结果判断】

1.试验有效性　不加样片组活菌计数在1×104～2×104cfu／ml，且样本振荡前后平均菌落数差值在10%以内，试验有效。

2.结果有效性　试验样片的抑菌率与对照样片的抑菌率的差值＞26%，即可认定该样片具有抑菌作用。