显微镜的使用和水浸片制作

一、光学显微镜的使用与保养

1.光学显微镜的使用方法

低倍镜观察（物镜×4，×10，×20） 先将低倍镜的位置固定好，然后放置标本片，调节光亮度或转动反光镜，调好光线，将物镜提高，向下调至看到标本，再用细调对准焦距进行观察。除少数显微镜外，聚光镜的位置都要放在最高点。

高倍镜观察（物镜×40） 低倍镜对准焦点后，转换到高倍镜基本上也对准焦点，只要稍微转动微调即可。虹彩光圈要放大，使之能形成足够的光锥角度。稍微上下移动聚光镜，观察图像是否清晰。

油浸镜观察（物镜×100） 油浸镜的工作距离很小，所以要防止载玻片和物镜上的透镜损坏。显微镜有自动止降装置的，载玻片上加香柏油后，将油浸镜下移到油滴中，缓慢调节到停止下降为止，最后用微调向上调准焦点。

使用时，一般是经低倍、高倍到油浸镜，当高倍物镜对准标本后，再加油浸镜观察。油浸镜所用的香柏油要洁净，聚光镜要提高到最高点，并放大聚光镜下的虹彩光圈，否则会降低数值口径而影响分辨率。

图7 光学显微镜结构

图8 解剖镜结构

2.光学显微镜的保养

显微镜是精密贵重的仪器，必须很好地保养。显微镜用完后要放回原来的镜箱或镜柜中，同时要注意下列事项：

（1）观察完后，移去观察的载玻片标本。

（2）用过油浸镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着二甲苯擦拭2～3次，最后再用擦镜纸将二甲苯擦去。

（3）转动物镜转换器，放在低倍镜的位置。

（4）将镜身下降到最低位置，调节好镜台上标本移动器的位置，罩上防尘套。

二、水浸片的制作方法及注意事项

在病原和病理检查时，最常用的方法是制作水浸片，用显微镜观察。特别是寄生虫的识别和诊断必不可少。用碘液（鲁戈氏液）或碘酊滴加在盖玻片的边缘，逐渐浸入样品、染色，变色或杀死寄生虫、藻类等，有利于观察和识别寄生虫的组织结构。

1.水浸片的制作

取干净的载玻片，从要待检查的部位取一小块组织，置于载玻片上的水滴中，滴一滴洁净的水，用镊子夹住待检组织在水滴中轻轻搅动、展开。再取一片洁净的盖玻片，将其一边与载玻片接触，倾斜着将盖玻片轻盖在待检组织上，用镊子柄或铅笔轻压，如水过多可用吸水纸（或纱布）从盖玻片边缘吸去多余的水。水浸片制作完成。

2.注意事项

（1）所取样品不宜过多，韧性较强的组织要用剪刀剪成细长条或切成薄片，否则会影响透光率，不能进行观察。

（2）先在载玻片上滴一滴水，然后再放组织，否则会产生气泡，影响观察。用镊子柄或铅笔轻压时应掌握力度，不宜过于用力，以免压破盖玻片。

（3）载玻片上滴的水滴要根据不同的组织采用不同的水，检查水生动物能跟水接触的组织器官，淡水动物用淡水，海水动物用海水，不与水接触的水生动物组织器官则用生理盐水，否则检查的病原体会由于渗透压的不同而引起碎裂、皱缩或死亡而影响诊断。

（4）水浸片制成后应立即使用，不能长时间保存。