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细胞逆分化克隆

时间:2022-02-11 理论教育 版权反馈
【摘要】:小鼠ES细胞的成功分离与建系,促进了对包括人在内的其他物种的ES细胞研究。现已有更多人ES细胞系建立。与小鼠ES细胞比较,人ES细胞在细胞表面标志、体外培养条件和生长特点等方面均有一定的差异。人ES细胞的建立对人发育生物学、新药发现和移植治疗等基础和应用研究都有重要意义。
胚胎干细胞_分子医学导论

二、胚胎干细胞

EC细胞的成功分离和深入研究,为分离、培养“真正”的ES细胞提供了理论和实验基础。如EC细胞在与有丝分裂不活跃的小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)共培养时能建立高效率的EC细胞培养体系,且能维持EC细胞的高分化潜能;而EC细胞单独培养则细胞易分化且扩增困难。在此基础上,1981年Martin和Evans将小鼠囊胚的内细胞团(inner cell mass,ICM)分离与MEF共培养,培养基添加β巯基乙醇和10%~20%的胎牛血清,几天后,在各种分化的克隆中有一些未分化的克隆,分离单个未分化克隆,继续培养,产生未分化细胞的次级克隆,进一步扩增这些克隆,建立了连续的ES细胞系

小鼠ES细胞的成功分离与建系,促进了对包括人在内的其他物种的ES细胞研究。1998年Thomson等将体外授精者捐赠的人胚胎培养至囊胚期,分离内细胞团,与小鼠MEF共培养,分离并建立了5株胚胎干细胞系;维持未分化状态4~5个月后,仍能分化为滋养层和内、中、外3个胚层的细胞。现已有更多人ES细胞系建立。与小鼠ES细胞比较,人ES细胞在细胞表面标志、体外培养条件和生长特点等方面均有一定的差异。人ES细胞的建立对人发育生物学、新药发现和移植治疗等基础和应用研究都有重要意义。

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