基本机制和酶系

十九、DNA复制I：基本机制和酶系

1.比较DNA的保留复制、半保留复制和分散复制。

2.请叙述证明DNA复制是半保留的实验及结果，确保排除掉各种分散复制机制。

3.比较DNA复制的连续性复制模式、不连续性复制模式和半不连续性复制模式。

4.请叙述证明DNA复制是半不连续的实验及结果。

5.请解释短脉冲标记的核苷酸为什么只出现在野生型大肠杆菌细胞的DNA短片段中。换句话说，为什么在这些细胞中DNA复制是全不连续性的，而不是半不连续性的？

6.为什么在自然界中不可能观察到全连续性的DNA复制？

7.请叙述测量冈崎片段的大小的实验及结果。

8.给出能证明枯草芽胞杆菌(B.subtilis)染色体的DNA复制是双向复制，而ColEⅠ质粒的复制是单向复制的电子显微镜实验证据。

9.画出λ噬菌体滚环复制的示意图。

10.比较解旋酶和拓扑异构酶二者酶活性的异同。

11.画出DNA解旋酶实验所用底物的示意图，并解释DNA解旋酶实验，并给出范例结果。

12.列举出SSBs在DNA复制中的作用。

13.列出SSB为DNA合成中所必需的实验证据。

14.列出SSB能防止正在合成中的DNA发生降解的实验证据。

15.为什么在一条超螺旋DNA链上产生一个缺口，超螺旋结构会解除？

16.叙述一种分析DNA拓扑异构酶的实验方法，并给出范例结果。

17.如何知道DNA旋转酶能在DNA和酶的酪氨酸之间形成共价键？此共价键有什么优势？

18.基于酵母DNA拓扑异构酶的结构，给出一种能解释DNAsegment-passing的模型

19.图示大肠杆菌DNA聚合酶的校对过程。

20.大肠杆菌DNA聚合酶I有哪些酶活性？这些酶活性在DNA复制过程中各自有什么作用？

21.Klenow片段和完整的大肠杆菌DNA聚合酶I有何不同？在缺口平移中需要用哪种酶？在引物延伸中需要用哪种酶？为什么？

22.在大肠杆菌的三种DNA聚合酶中，哪一种对于DNA复制是必需的？给出证据。

23.DNA聚合酶III的哪种亚基具有DNA聚合功能？如何得知？

24.DNA聚合酶III的哪种亚基具有校对功能？如何得知？

25.从DNA复制校对功能的必要性解释DNA复制引发过程的合理性。

26.列出真核细胞的几种DNA聚合酶和它们各自的功能。简述证明这些功能的实验证据。

27.比较DNA损伤和DNA突变两个概念。

28.比较紫外线、X射线和γ射线造成的DNA损伤。

29.哪两种酶可以直接修复DNA的损伤。图示它们的修复机制。

30.比较碱基切除修复和核苷酸切除修复，并画出两种过程的示意图。这两种修复分别是哪种类型DNA损伤后的最初反应？

31.偶联转录的核苷酸切除修复(NER)和对全基因组的核苷酸切除修复(NER)有什么不同？

32.绝大多数的着色性干皮病(XP)患者缺失哪种DNA修复系统？为什么着色性干皮病患者对紫外线十分敏感？对于着色性干皮病患者来说，其主要的替补DNA修复系统是什么？

33.绝大多数的着色性干皮病-V(XP-V)患者缺失了哪种DNA修复系统？为什么XP-V患者的皮肤癌患病率比典型的着色性干皮病患者的要低？对于核苷酸切除修复(NER)系统的缺失，XP-V患者采用的是什么替补修复系统？

34.画出大肠杆菌的错配修复的示意图。

35.画出大肠杆菌的重组修复的示意图。

36.画出大肠杆菌的错误倾向修复(Error-pronebypasssystem)的示意图。

37.请解释为什么重组修复和错误倾向修复并不是真正的修复系统。