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液体菌种消毒与灭菌

时间:2022-11-16 百科知识 版权反馈
【摘要】:培养罐在每次生产前都必须对其进行彻底的清洗、消毒后使用。液体培养基在进入到培养罐后,要在罐内进行灭菌,这与制作固体菌种时对固体培养基灭菌的原理是相同的。液体培养基在124℃灭菌35~40分钟。液体培养基培养罐内灭菌完成后,经冷水降温后要在进气阀接上通气管,所以通气管和进气阀都要经过消毒,尤其在二者连接时要用火焰灼烧灭菌。液体菌种在培养过程中,要定期对培养基内菌丝生长情况进行观察、检测。

(二)液体菌种消毒与灭菌

我们在制作液体菌种时,消毒与灭菌是一项核心的工作,它要比做固体菌种更加严格,稍有不慎则会满盘皆输。

1.准备期消毒、灭菌

培养罐在每次生产前都必须对其进行彻底的清洗、消毒后使用。内壁黏附的污物要清洗掉,检查各个阀门、加热棒、控制柜、气泵等是否正常,如有故障,需及时排除,并进行罐体内部的彻底杀菌,必用的方法是煮罐。煮罐要关闭罐顶部的接种阀和进气阀,加水至视镜中线,启动加热器,当温度达到124℃时维持35分钟后关闭排气阀,20分钟后把煮罐水放出即可进入生产。

2.营养液制作期消毒、灭菌

液体培养基在进入到培养罐后,要在罐内进行灭菌,这与制作固体菌种时对固体培养基灭菌的原理是相同的。液体培养基在124℃灭菌35~40分钟。该过程要通过排料来对管道进行消毒。同时气泵中的滤芯要在使用前半小时灭菌装好,并在灭菌计时开始就开泵通气,以保证空气的无菌状态。

3.接种期消毒、灭菌

液体培养基培养罐内灭菌完成后,经冷水降温后要在进气阀接上通气管,所以通气管和进气阀都要经过消毒,尤其在二者连接时要用火焰灼烧灭菌。接种时关闭排气阀并点燃火圈,使火圈火焰封住接种口,之后旋开接种口盖,按照无菌操作于火圈无菌区拔下棉塞并倒入菌种,旋紧接种盖。

4.培养期消毒、灭菌

液体菌种在培养过程中,要定期对培养基内菌丝生长情况进行观察、检测。检测要通过排料口取样。每次取样完毕,都要用酒精灯外焰对排料口进行灼烧杀菌。

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