小鼠的准备和要求

为使转基因实验顺利进行，需要定期提供相当数量的母鼠作为卵供体和假孕母鼠，以及一批相对稳定的正常公鼠和结扎公鼠。所用的各类鼠及要求如表4-1所示。

1.卵供体母鼠　一般用4～6周母鼠作为超排卵供体，每只每次产20～30只卵。如按每周做2～3次转基因实验为例（表4-2）。

表4-1　各类鼠及要求

表4-2　按每周做2～3次转基因实验举例

2.与卵供体母鼠交配的正常公鼠　公鼠性成熟在6～8周，一般能维持1～2年，但纯系公鼠只可使用8～10个月，此后公鼠的生殖功能下降。每只公鼠单笼饲养以免咬伤，饲养1～2周或以后方可与超排卵母鼠交配。每个做超排卵的母鼠与1个公鼠交配，次日上午检查是否有精栓并做记录。如两次以上都不能使母鼠有精栓，或总的精栓产生率低于60%～80%，则需更换公鼠。为保证有足够的受精卵，公鼠最好每周只交配一次。如果每周做2～3次微注射，每次10只卵供体母鼠，则需要饲养20～30只正常公鼠。

3.为产生假孕母鼠的结扎公鼠　受结扎公鼠需8周以上。做正式实验之前，每只结扎公鼠至少需要先后使3只母鼠产生精栓的母鼠均不受孕，然后结扎公鼠方可用于正式实验。结扎公鼠可每晚与母鼠交配，但最好是隔日一次。结扎公鼠使母鼠产生精栓的能力可维持两年。每只结扎公鼠如经4～6次都不能使母鼠产生精栓，则结扎公鼠必须更换。按每周做2～3次微注射计算，每次需要3～4只假孕母鼠，则需养10～15只结扎公鼠。

4.作为卵受体与养母的假孕母鼠　母鼠在发情期与结扎公鼠交配即产生假孕母鼠，它作为微注射后受精卵的受体及其后的养母。这种母鼠以6周至5个月为宜，体重最好大于20g。已产过仔或成功抚育过幼鼠的假孕母鼠最理想。母鼠一般4～5d进入1次发情期。一只结扎公鼠可配置2～4只母鼠。按每周做2～3次微注射计算，每次需要2～4只假孕母鼠，则需要20～30只母鼠与结扎公鼠合笼以产生假孕母鼠。为使用的假孕母鼠可在精栓产生2周后再与结扎公鼠交配。