【原理】 过碘酸-席夫反应（periodic acid-Schiff reaction，PAS）中过碘酸是一种氧化剂，细胞内含有乙二醇基的糖类在过碘酸的作用下氧化产生双醛基，后者与席夫（Schiff）染液结合，形成紫红色化合物，定位于含有多糖成分的部位。根据胞质中糖原含量多少不同，阳性物质可呈现粗细不一红色颗粒、块状物或均匀红色，PAS又称为糖原染色。其反应过程如下：
1.醛基的生成：
2.席夫试剂中的红色品红转变成无色品红：
3.二分子醛基与一分子无色品红结合，形成新的紫红色化合物：
【试剂】
1.固定液 95%乙醇。
2.1%过碘酸水溶液（用时新鲜配制）。
3.席夫染液 碱性品红1g，偏重亚硫酸钠（Na2S2O5）2g，1mol/L盐酸20ml，蒸馏水100ml，活性炭（规范名称：药用炭）1g。将100ml蒸馏水煮沸，移开火焰后，缓缓加入碱性品红1g，待冷却至50～60℃时加入1mol/L盐酸20ml混匀，再冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2g混合溶解，立即加盖避光过夜。次日加入活性炭1g摇匀过滤，滤液应为无色透明，置于冰箱保存。
【操作方法】
1.新鲜干燥涂片标本用95%乙醇固定10min，流水冲洗，晾干。
2.浸入1%过碘酸溶液中氧化10～20min（暗处），流水冲洗，晾干。
3.置于席夫染液内于37℃水浴箱中作用45～60min。
4.用亚硫酸水溶液洗3次，每次2min。
5.用流水冲洗5min后晾干。
6.用2%甲绿水溶液复染15min或苏木精溶液复染1～5min。
7.流水冲洗，晾干后镜检。
【结果】 阳性反应为胞质内出现红色颗粒或弥漫状红色物质。
1.粒细胞系 ①中性粒细胞糖原含量程度参考标准：胞质无色（-）；胞质呈淡红色，无颗粒（＋）；胞质呈红色，有少量颗粒（
）；胞质呈暗红色，颗粒较密（
）；胞质呈紫红色，颗粒极密，无空隙（
）。②正常粒细胞系染色反应，原粒细胞多呈阴性反应，也可呈弱阳性。自早幼粒细胞以下阶段随着细胞的成熟程度，其阳性反应逐渐增强。嗜酸粒细胞颗粒本身不着色，但颗粒间的胞质呈弥漫性阳性反应。嗜碱粒细胞呈阳性反应，颗粒紫红色，大小不一。
2.淋巴细胞系 ①淋巴细胞糖原含量程度参考标准：胞质内无红色颗粒（-）；胞质内有少数红色颗粒，一般少于10个（＋）；胞质内有较粗红色颗粒，10个以上（
），有粗大红色颗粒或少数红色块状物质（
）；有多数粗大颗粒并有红色块状（
）。②正常淋巴细胞染色反应，大多数淋巴细胞呈阴性反应，少数为（＋）的阳性反应。
3.红细胞系 ①幼红细胞糖原含量程度参考标准：胞质内无红色颗粒（-）；有少数红色颗粒（＋）；有较粗红色颗粒或弥漫红色（
）；有粗大红色颗粒或呈深红色（
）；有粗大块状红色或呈紫红色颗粒（
）。②正常红细胞系染色反应，幼红细胞和红细胞均呈阴性反应。
4.巨核细胞系 ①巨核细胞糖原含量程度参考标准：胞质内无红色颗粒（-）；含少量糖原，常定位于核膜附近（＋）；含中等量糖原，定位于核膜处或分散胞质中占胞质1/3（
）；大量糖原，呈块状分散于胞质的1/2（
）；糖原充满整个胞质（
）。②巨核细胞及血小板染色反应均呈阳性。
5.其他 单核细胞呈阴性或阳性反应，颗粒细小常位于胞质边缘；浆细胞大多呈阴性，少数呈阳性，呈红色细颗粒状；组织细胞呈阴性反应，巨噬细胞可呈阳性反应，呈红色细颗粒状。
以上各类细胞各观察100个细胞，按以上标准评分计算阳性率及积分。
阳性率%＝（＋）＋（
）＋（
）＋（
）；
积分＝（＋）×1＋（
）×2＋（
）×3＋（
）×4。
【临床意义】
1.红细胞系 ①红血病和红白血病幼红细胞呈阳性反应，其反应程度很强，百分比很高。其他类型急性白血病及慢性白血病红细胞系列大多呈阴性反应，偶见弱阳性反应；②缺铁性贫血、地中海性贫血以及MDS幼红细胞可出现阳性反应，有时百分比也较高，红细胞也可呈阳性反应；③巨幼细胞贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血幼红细胞呈阴性反应，有时仅个别溶血性贫血者的幼红细胞呈阳性反应。
2.白细胞系 ①急性淋巴细胞白血病：原始淋巴细胞多呈阳性反应，为红色粗颗粒或红色块状，也可呈阴性反应。②急性粒细胞白血病：原始粒细胞大部分呈阴性反应，小部分呈均匀分布的红色细颗粒状或均匀红色。③急性单核细胞白血病：原始单核细胞的阳性反应呈红色细颗粒状，弥散分布，胞质边缘处颗粒可较粗大。
3.其他细胞系 ①淋巴瘤及慢性淋巴细胞白血病，两者均呈阳性反应。里-斯（Reed-Sternberg）细胞大多阴性，少数为弱阳性反应，有助于和巨核细胞的鉴别。②戈谢细胞呈强阳性反应；尼曼-皮克细胞呈阴性或呈弱阳性反应，且空泡中心为阴性反应。③骨髓转移腺癌细胞呈强阳性反应，为红色细颗粒状或粗颗粒状，也可呈红色块状。有助于与白血病细胞鉴别。
【注意事项】
1.席夫染液一旦由无色变为红色，则不能使用。
2.染色后应及时观察并记录，标本长期保存会逐渐褪色。
3.过碘酸的氧化时间为20min，时间过长可氧化为羧基。
4.应做唾液消化对照试验，以鉴别糖原与其他多糖类物质。因糖原可被唾液水解，使反应变为阴性，而多糖类则相反。
附：唾液消化对照试验
取同一标本涂片，经固定后加水解液（新鲜唾液4ml，加1/15mol/L磷酸缓冲液1ml，pH7.0），滴满整个涂片，置37℃水浴箱中作用30～60min，再流水冲洗后按上法染色。糖原可被唾液水解，使反应变为阴性。若PAS反应呈阳性，经淀粉酶水解后仍为阳性，即是其他多糖类。
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