食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法）

实验十　食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法）

实验目的

（1）学习索氏抽提法测定脂肪含量的原理与方法。

（2）掌握索氏抽提法的基本操作要点及影响因素。

实验原理

利用脂肪能溶于有机溶剂的性质，在索氏提取器中将样品用无水乙醚或石油醚等溶剂反复萃取，提取样品中的脂肪后，蒸去溶剂，所得的物质即为脂肪（或称粗脂肪）。

实验试剂与实验器材

1.实验试剂

抽提剂：无水乙醚（不含过氧化物）或石油醚（沸程为30～60℃）。

2.实验器材

索氏提取器（图3-3）、恒温水浴锅、干燥器、电热恒温鼓风烘箱等。

图索氏提取器

实验步骤

1.样品处理

（1）固体样品：准确称取均匀样品25（精确至0.01mg），装入滤纸筒内。

（2）液体或半固体样品：准确称取均匀样品8g（精确至0.01mg），置于蒸发皿中，加入海砂约20g，搅匀后在沸水浴中蒸干，然后在95～105℃条件下干燥。样品研细后全部转入滤纸筒内，用蘸有乙醚的脱脂棉擦净所用器皿，并将脱脂棉也放入滤纸筒内。

2.索氏提取器的清洗

将索氏提取器各部位充分洗涤，并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在（103±2）℃的烘箱内干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg）。

3.样品测定

（1）将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶，从索氏抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2／3处，通入冷凝水，将脂肪烧瓶瓶底浸没在水浴中加热，用一小团脱脂棉轻轻塞住冷凝管上口。

（2）抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液每6～8min回流一次为宜。

（3）抽提时间的控制：抽提时间视样品中粗脂肪含量而定，一般样品提取6～12h，坚果样品提取约16h。提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。

（4）提取完毕，取下脂肪烧瓶，回收无水乙醚或石油醚。待脂肪烧瓶内无水乙醚仅剩下1～2mL时，在水浴上除尽残留的溶剂，于（105±1）℃烘箱内干燥2h后，置于干燥器中冷却至室温，称量。继续干燥30min后冷却，称量，反复干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg）。

结果与计算

将数据填写在表3-7中。

表3-7　数据记录表

式中：X——样品中粗脂肪的质量分数（%）；

　　　m——样品的质量（g）；

　　　m₀——脂肪烧瓶的质量（g）；

　　　m₁——脂肪和脂肪烧瓶的质量（g）。

注意事项

（1）抽提剂无水乙醚是易燃、易爆物质，应注意通风，并且附近不能有火源。

（2）样品滤纸筒的高度不能超过虹吸管，否则上部脂肪不能提尽而易造成误差。

（3）样品和无水乙醚提取物在烘箱中干燥时，时间不能过长，以防止不饱和的脂肪受热氧化而增加质量。

（4）脂肪烧瓶在烘箱中干燥时，瓶口侧放，以利于空气流通，而且先不要关上烘箱门，在90℃以下鼓风干燥20min，驱尽残余溶剂后再将烘箱门关紧，升至所需温度。

（5）乙醚若放置时间过长，会产生过氧化物。过氧化物不稳定，当蒸馏或干燥时会发生爆炸，故使用前应严格检查，并除去过氧化物。

①检查方法：取5mL乙醚置于试管中，加碘化钾溶液（100g／L）1mL，充分振摇1min，静置分层。若有过氧化物则释放出游离碘，水层呈黄色（或加4滴5g／L淀粉指示剂显蓝色），则该乙醚须处理后使用。

②去除过氧化物的方法：将乙醚倒入蒸馏瓶中，加入一段无锈铁丝或铝丝，收集重蒸馏乙醚。

（6）反复加热可能会因脂肪氧化而增重，质量增加时，以增重前的质量为恒重值。

思考题

（1）简述索氏提取器的提取原理及应用范围。

（2）使用无水乙醚作脂肪抽提剂时，注意事项有哪些？为什么？

（3）潮湿的样品可否采用无水乙醚直接提取？为什么？