【摘要】:主要用于免疫复合物的检测。血清中IgD含量低,正常人血清IgD用免疫比浊技术难以测出,目前多用ELISA双抗体夹心法测定其含量。ELISA 常用双抗体夹心技术检 测,其操作简单,敏感性很高,是目前国内测定血清IgE最常用的技术。
一、免疫球蛋白定量检测方法
(一)IgG、IgA、IgM的测定
1.单向琼脂扩散技术 单向琼脂扩散技术(见第六章)操作简单,不需要特殊设备;但敏感度不高,检测时间比较长,批内变异系数大,准确性受多种因素影响,抗血清用量大。
2.免疫比浊技术 分为透射比浊技术和散射比浊技术。主要用于免疫复合物的检测。该法简便、快速可自动化,敏感度高,准确性好,批内变异系数为2%~4%。
(二)IgD的测定
血清中IgD含量低,正常人血清IgD用免疫比浊技术难以测出,目前多用ELISA双抗体夹心法测定其含量(见第六章)。
(三)IgE的测定
1.血清总IgE的测 定正常情况下血清中IgE含量很低,仅为1μg/L以下,用常规的免疫扩散技术很难检测到。因此,临床上常用敏感度较高的技术进行测定。
(1)ELISA 常用双抗体夹心技术检 测,其操作简单,敏感性很高,是目前国内测定血清IgE最常用的技术。
(2)固相放射免疫测定技术 常用双抗体夹心技术检测。该法敏感性很高,但需制备放射性核素标记物,有放射性核素污染的危险和需γ计数设备等缺点。
近年来,临床上已用生物-亲和素-ELISA、化学发光免疫测定等敏感度更高的新技术来检测血清IgE。
2.特异性IgE的测定 特异性IgE的检测技术,主要有放射免疫吸附技术和ELISA。商品化的试剂盒提供了多种特异性的超敏原,包括食物、吸入物以及药物等,利用这些特异性超敏原就可以检测到血清中特异性IgE抗体。
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