灭菌是预防医院内感染的重要措施之一，灭菌效果监测（the sterilization effect of monitoring）是评价其灭菌设备运转是否正常、灭菌药剂是否有效、灭菌方法是否合理、灭菌效果是否达标的唯一手段，在医院灭菌工作中至关重要。医院灭菌效果监测人员需经过专业培训，掌握一定的灭菌知识，熟悉灭菌设备和药剂性能，具备熟练的检验技能；选择合理的采样时间（灭菌后、使用前）；遵循严格的无菌操作。监测使用的化学指示剂（chemical indicator）、指示卡、指示带以及菌片必须采用经卫生部批准使用的物品，并在有效期内使用。
一、物理检测法
根据WS 3 1 0.3-2009第4.4.2条压力蒸汽灭菌的物理监测法要求，每次灭菌应连续监测并记录灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。同时应记录所有临界点的时间、温度与压力值，结果应符合灭菌的要求。因此，所使用的灭菌设备必须配备。
热电偶检测法检测时，将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点。关好柜门；将导线引出，在记录仪中观察温度上升与持续时间。若所示温度（曲线）达到预定温度，则灭菌温度合格。
二、化学监测法
化学指示剂的监测，是一种间接指标，可用于日常监测。
1.B-D试验 见图5-7、图5-8，根据WS 310.3-2009相关规定进行设备运行前测试。如预真空压力蒸汽灭菌器应在每日开始灭菌运行前空载进行B-D试验。
图5-7 B-D试验（灭菌前）
图5-8 B-D试验（灭菌后）
2.化学指示胶带监测法 见图5-9，将化学指示胶带粘贴于待灭菌物品包外，经1个灭菌周期后，可根据其颜色的改变，判断是否经过灭菌处理。
3.化学指示卡监测方法 见图5-10，化学指示卡既能指示蒸汽温度，又能指示温度持续时间，放入待灭菌的器械包中央，经1个灭菌周期后，取出指示卡，根据其颜色及性状的改变判断是否达到了灭菌条件。
4.结果判定 监测时，所放置的指示卡的性状或颜色均变至规定的条件，可认为该器械包灭菌合格。
图5-9 化学指示胶带监测（灭菌前、后）
图5-10 化学指示卡监测（灭菌前、后）
三、生物监测法
1.指示菌株（indicator strain） 见图5-11、图5-12，用于湿热灭菌时（高压蒸汽灭菌）将2个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭菌小纸袋内置于标准试验包中心部位，经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包内指示菌片，投入溴甲酚紫蛋白胨水培养基中，经56℃培养7d，观察培养基颜色变化。检测时设阴性和阳性对照。每个指示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基均不变色，判定为灭菌合格；指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌不合格。
图5-11 标准试验包、嗜热脂肪杆菌芽胞菌片（灭菌前）
图5-12 标准试验包、嗜热脂肪杆菌芽胞菌片（灭菌后）
2.快速指示菌株 用于压力蒸汽灭菌时需1～3小时得出结果，用于环氧乙烷灭菌时需4小时得出结果。
3.干热灭菌株 指示菌株用于干热灭菌时将枯草杆菌芽胞菌片分别装入灭菌试管内（1片/管）。灭菌器与每层门把手对角线内、外角处放置2个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至80℃时，加盖试管帽后取出试管。在无菌条件下，加入普通营养肉汤培养基（每管5ml），以37℃培养48h，观察初步结果，无菌生长管继续培养至第7天。若每个指示菌片接种的肉汤管均澄清，判为灭菌合格；若指示菌片之一接种的肉汤管浑浊，判为不合格。对难以判定的肉汤管，可取0.1ml接种于营养琼脂平板上，用灭菌棒涂匀，放于37℃培养48h，观察菌落形态，并做涂片染色镜检查，判断是否有指示菌生长；若有指示菌生长，判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭菌合格。
四、化学消毒剂的监测
化学消毒剂在使用过程中，时间的延长，以及光、热等因素都会对其有效成分产生一定的影响，尤其是一些自行配制的易挥发消毒剂，随着使用范围的扩大，其浓度也在不断的变化，因此必须定时进行监测，包括消毒剂的浓度、浸泡效果和消毒液微生物的监测。例如，戊二醛浓度指示卡，不同的测试卡有不同的测试范围，将所需浓度的监测卡片浸于戊二醛溶液中3s取出，用中性滤纸吸取多余的液体，3～5min后读值，不可超过8min，颜色变为均匀黄色为合格。
图5-13 3M标准试验包（灭菌前）
图5-14 3M标准试验包（灭菌后）
（王春娥）
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