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目前常用的基因座

时间:2022-04-16 理论教育 版权反馈
【摘要】:为了与已建立的STR数据库匹配,目前,国内外的多色荧光标记miniSTR复合扩增体系多选用CODIS基因座为主。将这2个体系在同一试管中扩增后,用链霉亲和素磁珠对这两个复合扩增体系的PCR产物分离,分别电泳,得到基因型图谱。评估结果表明它提高了严重降解的微量DNA检材的检出成功率。其现已应用于法医实践。2006年,这6个miniSTR被EDNAP纳入标准基因座备选范围。同年,HILL在AAFS上介绍了27个新的非CODIS系统miniSTR基因座。

三、目前常用的miniSTR基因座

(一)以CODIS为基础的miniSTR基因座

为了与已建立的STR数据库匹配,目前,国内外的多色荧光标记miniSTR复合扩增体系多选用CODIS基因座为主。如2002年,BUTLER等建立的5个miniSTR复合扩增体系,每个体系包括3个STR基因座,除CODIS外,还有PentaD、PentaE基因座。此后,Bode Technology Group建立了2个体系: BodePlex 1(D13S317,D21S11,D7S820,D16S539和CSF1PO)和BodePlex 2(TPOX,FGA,D7S820和D18S51)。它们在“9.11”遇难者遗骸的个人识别中发挥了重要作用。

在我国,刘超等重新设计了2个体系的miniSTR引物,将体系1(D5S818,D8S1179和D16S539)的正向引物5’端进行荧光素标记,将体系2(vWA,D21S11和D13S317)的正向引物5’端用荧光素标记,其反向引物的5’端用生物素标记(表21-6)。将这2个体系在同一试管中扩增后,用链霉亲和素磁珠对这两个复合扩增体系的PCR产物分离,分别电泳,得到基因型图谱。该技术可以提高1次实验达到的个体分辨力,也降低了成本。

表21-6 2个miniSTR(属CODIS系统)扩增体系引物及标记

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2006年AB公司推出了商品化的miniFiler试剂盒。它包括了8个CODIS位点(D13S317,D7S820,D2S1338,D21S11,D16S539,D18S51,CSFIPO,FGA)及性别位点Amelogenin,片段长度范围为74~245 bp。评估结果表明它提高了严重降解的微量DNA检材的检出成功率。其现已应用于法医实践。

(二)非CODIS系统miniSTR研究

2005年,COBLE等建立了NC01 miniplex(D10S1248,D14S1434,D22S1045)和NC02 miniplex(D4S2364,D2S441,D1S1677)2个体系,研究结果显示其分型可靠,灵敏度高。2006年,这6个miniSTR被EDNAP(European DNA Profiling Group)纳入标准基因座备选范围。同年,HILL在AAFS(American Academy of Forensic Sciences)上介绍了27个新的非CODIS系统miniSTR基因座。后来,类似的报道很多。如2007年韩国的CHUNG等报道了采用3个非CODIS复合扩增系统(体系Ⅰ为D10S1248,D14S1434,D22S1045;体系Ⅱ为D1S1677,D2S441,D4S2364;体系Ⅲ为D3S3053,D6S474,D20S482)。

2009年,我国冯冬亮、刘超等报道了非CODIS系统miniSTR的应用研究,见图21-4。

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图21-4 复合扩增3个非CODIS基因座的miniSTR分型图谱

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