细胞膜上能量依赖外排泵介导的及其逆转

多药耐药基因mdr－1及其蛋白Pgp（P170）、多药耐药相关蛋白（MRP）及乳癌耐药蛋白（BCRP）都是ATP结合盒（ABC）膜转运蛋白超家族成员，需ATP提供能量将药物自细胞内排出，细胞内药物浓度降低。研究较多，较透彻的是mdr－1／Pgp，在7号染色体上，为蒽环类、蒽醌类、表鬼臼毒素类、吖啶类和长春碱类等耐药主要因素。其临床意义为：初治急性白血病约20%过度表达mdr－1为原发耐药重要原因，复发者约50%高表达，高表达者CR低＜50%，而阴性者CR可80%～90%，复发率分别为＞90%和＜50%。我院用RT－PCR检测85例急性白血病（AL）患者mdr－1mRNA表达。初治组47例，21例（44．7%）mdr－1阳性，CR率23．9%，而mdr－1阴性CR为88．5%。复发难治组mdr－1阳性76%，无1例再次CR。CR组28例mdr－1阳性率17．9%，长期生存者21例（生存期＞5年），mdr－1阳性14．3%。如mdr－1于CR期持续高表达常于CR后半年内复发。

MRP基因与mdr－1有14%同源序列，位于16p13．1上编码蛋白190。转染MRPcDNA的Hela细胞中MRP　mRNA明显增高，对多柔比星、长春新碱、依托泊苷的耐药分别提高15倍、25倍和5倍，而mdr－1mRNA和拓扑异构酶（Topo）ⅡmRNA无变化。我科用RT－PCR法检测65例不同时期AL患者MRP。发现初治组33例AL，9例（27%）MRP高表达，其中ALL阳性率40%，AML为25%。MRP－与MRP＋者CR分别为84%和25%。复发难治组18例，11例MRP高表达再CR率18．2%，7例MRP阴性者CR　84%。长期生存组14例（CR 5～14年），2例MRP低表达尚未复发。MRP与mdr－1表达间无相关性，可各自、或同表达。

近来，发现乳癌MCFT／Adr　VP细胞系虽无Pgp和MRP高表达，但对多柔比星和米托蒽醌耐药，对长春新碱、顺铂和紫杉醇敏感。经典Pgp抑制药环孢素A（CsA）不能逆转耐药，而ATP完全缺乏可阻止柔红霉素外排。这种新ATP依赖的药物外排泵称为乳癌耐药蛋白（BCRP）或ATP结合盒蛋白（ABCP）。耐药谱有米托蒽醌、多柔比星、柔红霉素、拓扑替康。多发性骨髓瘤细胞系8226／MR20高表达BCRP。我科检测初治AL48例，BCRP阳性19例（37．6%），CR31．6%，而阴性为79．3%，说明BCRP阳性缓解率低。化疗敏感组BCRP水平为0．315±0．296，而耐药组为0．962±0．426，说明耐药组BCRP明显增高。AL中ALL　13例，9例阳性（69．3%），而AML59例，22例阳性（37．3%），但AML亚型间表达BCRP无差异。Ross等研究发现BCRP高表达对AML有重要预后意义。我们以RT－PCR检测了51例初治及CR后1年内复发的13例AML患者BCRP表达水平发现：①51例初治者BCRP阳性20例，CR　7例（35%），阴性31例CR　28例（90．3%），而且1个疗程取得CR者BCRP　mRNA表达水平较未CR者低约3倍；②AML各亚型中以M3表达BCRP低于而M5高于其他类型，但无统计学差异；③一年内复发13例中，BCRP表达明显高于其初治时，经治疗再次CR　5例，其BCRP表达明显低于8例未再次CR者。

由mdr－1／Pgp和MRP／P190所致MDR能以维拉帕米、奎宁、CsA、PSC　833、胺碘酮、利舍平等逆转。金雀黄素可逆转MRP和LRP介导的耐药。霉菌毒素fumitremorgin可特异性逆转BCRP对多柔比星、米托蒽醌和拓扑替康耐药，对mdr－1、MRP无用。近来，发现RNA干扰可特异性抑制其序列来源的基因。Wu等用小干扰性RNA（siRNA）可有效特异性抑制mdr－1／Pgp，使mdr1mRNA降解逆转耐药，对无关基因表达无作用，但抑制作用短仅72h，值得进一步开发。近来发现mTOR抑制剂雷帕霉素（西罗莫司）可逆转MDR1、MRP1和BCRP的耐药。